Аппликации из осенних листьев 3 класс: Аппликации из листьев на тему «Осень» для школы и детского сада

Автор: | 21.01.1970

Содержание

Аппликации из листьев на тему «Осень» для школы и детского сада

Привет всем! На повестке дня различные осенние аппликации из опавших листьев. Именно сейчас можно создавать удивительные композиции из природного материала. И многие родители получают задания от своих детей по созданию поделок)) Мы в этом тоже не исключение, поэтому сохраняю разные варианты подборок детского творчества.

Ранее я писала, как можно сделать осенний букет и описывала все новинки поделок на тему «Осень». Приглашаю к ознакомлению.

А сегодня мы с вами будем клеить листочки. Именно вариант с подложкой и называется аппликацией. И это один из любимых видов творчества у деток дошкольного и младшего школьного возраста.

Идей очень много, можете взять уже готовую, а можете додумать что-то свое. Но главное, это развитие моторики и фантазии у детей и приятное времяпрепровождение с родителями. Поэтому запасаемся терпением, хорошим настроением и творим вместе с чадами интересные поделочки.

Аппликации из осенних листьев для детей детского сада (средняя, старшая группа)

Начать лучше с того, что могут сделать самые маленькие детки. В аппликации должны быть простые линии и идеи. Не все детки в средней группе могут аккуратно вырезать ножницами по контуру. И вроде бы простая вещь может занять у них довольно много времени. Поэтому советую начать с чего-то очень простого, например, с изображения рыбок. Их можно сделать, как из одного листочка, так и из нескольких. Зависит от возможностей чада.

Наклеивать материал лучше на клей ПВА. Он считается самым безопасным для детей. Для рыбок самым удачным вариантом будут листья березы. Они имеют схожую форму капельки и доступны почти по всей России.

Далее можно создать милого павлина. Для этого привожу быстрый мастер-класс.

Нужно:

  • краски,
  • 2 листа А4,
  • ножницы,
  • клей ПВА,
  • листья.

Первым делом нужно распечатать два изображения птички на листе А4.

Тот вариант, что с ножками и без хвоста (рис.1) нужно раскрасить и вырезать по контуру.

На вторую основу (рис.2) начинаем наклеивать листья. Используем клей карандаш или ПВА. При необходимости элементы можно накладывать друг на дружку для того, чтобы хвост получился более пышным.

Как закончите с хвостом, поверх наклеиваете вырезанное и раскрашенное изображение птички и лапок.

Рисунок 1.

Рисунок 2.

Для деток старшей группы предлагаю идею цыпленка.нужно взять три листочка разных размеров.

Самый большой будет телом, средний — головой, а маленький — крылышками. Для ножек используем веточки. Для большей схожести ищем уже пожелтевший материал. Сюда подходит яблоня, тополь и береза.

Еще идея более простого цыпленка с курицей из одной-двух деталей. Для обтекаемой формы тела, листочек можно подрезать ножницами.

Также есть вариант бабочек, стрекоз и птичек. Сюда можно малину, смородину или клен. Туловище, усики и головку ребенок рисует самостоятельно.

Еще меня заинтересовал вариант из кленового листа с добавлением деталей из бумаги. Такие мордашки волков.

Глазки, носик и ушки можно нарисовать на аппликации маркером, а можно вырезать из самоклеящейся бумаги.

Мальчикам может быть интересно вырезание автомобилей. Делается это быстро, особенно, если свернуть листочек пополам. Но данное творчество потребует от малыша аккуратности, ведь нужно изобразить мелкие детали: окна и колеса.

Девочки же с удовольствием наклеят на бумагу красивый цветочек.

Также можно распечатать нижний рисунок и использовать его в качестве основы, наклеивая клен в нужные места.

Осенью солнышко не сильно нас радует, поэтому пусть детки сделают его сами.

Также наклеиваем заготовки по круглому контуру. Поверх которого потом зафиксируем круг из бумаги. Так мы скроем все неровности и изнанку поделки. А детки с удовольствием нарисуют личико своему солнцу.

Можно побаловаться и пофантазировать. Спросить ребенка, на кого похож листочек и попытаться его разрисовать. Получаются забавные мордашки.

Та же идея с развитием воображения, но с интересной композицией. Строим пирамидку из животных.

Быстро занять малыша можно подобным автопортретом. На бумаге рисуете мордашку, а малыш наклеивает прическу из природного материла. Забавно.

Из трех листиков березы помимо цыплят получаются очаровательные мышки.

Также можно сделать зайку.

Для этого возьмите 2 листочка рябины, и листочки разных размеров березы и акации. Сортируем их по размерам. Самый большой идет на тело. Средний на голову.

Из кусочков цветной бумаги делаем глазки и носик. Из кусочков рябины — ушки.

Нашла еще идею мышонка.

Филин — мудрейшая птица. Изображаем его.

Возьмем:

  • 2 листа березы, 2 смородины, 1 клена,
  • клей,
  • пластилин для глаз,
  • ножницы.

Первым этапом подрежем клен у кончика. Делаем предплечья. Так крылья будут более выразительны.

Вторым этапом собираем голову, клюв. Из белого и черного пластилина формируем глазки.

Далее берем вторую березовую заготовку и разрезаем ее пополам. Это крылья. Остается только сформировать ветку дерева и брови мудрейшей птицы.

Несложно сотворить и пингвина.

Для того, чтобы подстегнуть воображение, нашла много идей животных. Смотрите, какая прелесть.

Теперь более подробно рассмотрим из чего состоит слон.

Как делается лиса.

Еще идея несложного мыша.

Перед вами Буренка на полянке.

Еще вариант коровки.

Птички и попугаи поразительно повторяют оригинал.

Из природного материала можно даже сюжеты из сказок создавать. Например, вспомним про лису и ворону.

Идеи гусениц, жучков и бабочек сейчас перед вами. Всего одна ягодка и пара палочек и уже интересный герой для аппликации готов.

И еще мне захотелось поделиться с вами мастер-классом создания такого золотого петушка.

Это, конечно, не все легкие варианты. Также для маленьких деток есть идеи и в следующем разделе.

Как сделать ежика, льва и оленя (мастер-классы с шаблонами)

Замечала, что ребятки с удовольствием воспринимают изображения ежиков, львов и оленят. Давай и их сделаем в аппликации. Тем более, что все достаточно просто.

Например, из продолговатых листочков получаются отличные «иголки».

За основу можете использовать этот шаблон. Его можно просто сохранить и распечатать.

Или просто хаотично наклеенный материал также оденет нашего ежонка в пышную «одежду».

Используя разные оттенки листочков, вы получите более яркую аппликацию.

Ежик любит собирать грибы, ягоды и плоды. Поэтому используйте в творчестве гербарий и сушеные ягодки.

Также мне понравился мастер-класс создания ежа и бельчонка. Даю его вам ниже. Но здесь нужно поработать ножничками.

Перейдем к львенку. У него чудеснейшая грива. И конечно, наш материал полностью для нее подходит.

Распечатайте или срисуйте этот шаблон.

И украшайте ему гриву, наклеивая материал на клей ПВА. Сюда подходят только листья, которые имеют красноватую цветовую гамму.

Еще милый лев.

Сначала вырезаете заготовки по шаблону (рис.3) и раскрашиваете их.

Затем берете шаблон основу (рис.4) и оформляете его листьями. Не бойтесь создавать пышную гриву, наклеивая заготовки друг на друга.

Когда все будет готово, вырезанную и раскрашенную морду наклеиваем поверх гривы. Так мы скроем все некрасивости и неаккуратности.

Рисунок 3.

Рисунок 4.

Подобным образом выполняется и эта идея. Только мордашка другая.

Упрощенный вариант.

Так смотрится уже взрослый зверь с хорошей прорисовкой. Но техника создания все та же.

Не могла не показать этого царя. Прекрасен и колоритен.

Наверняка вам понравятся олени. С ветвистыми рогами и добрыми глазами. Их можно сделать и из всего трех деталей.

И усложнить поделку, добавив туловище и копыта.

Для детей старшего возраста не составит сложности выполнить такую композицию.

Смело дополняйте свое творчество подручными материалами, например акварелью и пластилином.

Делаем панно «Осенний лес» своими руками для детей 1,2,3 и 4 классов

Для школьников нужно что-то более трудоемкой и не менее красивое. Поэтому предлагаю изобразить лес. Но начать хочу с изготовления подобного вида панно.

Вот такой результат у нас получится, повторяя данный мастер-класс.

Нужно взять:

  • листья,
  • клей,
  • бумага формата А5,
  • ножницы,
  • краски с кистью и водой,
  • маркер.

Одну часть бумажной основы формата А5 расправляем. Сверху рисуем небо. На нем рисуем галочки маркером, это птички летят вдалеке.

В нижней части основы наклеиваем собранный природный материал с хвоинками.

Теперь берем оставшийся лист и отмечаем на нем овал с примерными размерами 10*16 см. Вырезаем его по линиям.

Получившуюся заготовку пропитаем клеем и зафиксируем поверх нашей «картины». В итоге в овале получается сам пейзаж.

При желании аппликацию можно украсить или подписать.

Также вас могут заинтересовать идет отдельно стоящих деревьев, например, березы.

Или тополя.

Чудесного клена, у которого ствол выполнен из отпечатка руки.

Лес может быть в стиле минимализма.

С современными элементами техники и реалий.

Создайте речку, подобрав похожие по цвету и размеру листья.

Используя цветной фон, вы получите яркое небо.

Также можно взять отдельные элементы леса. Например, изобразить веточку с птичками.

Поместить на полянку домик лесника.

Или даже замок.

Посмотрите, как оригинально заменили солнышко сухоцветом.

Сложный вариант с Жар-птицей с выставки.

От такого творчества как-то становится тепло и уютно на душе.

Аппликация «Осенний букет в вазе» из листьев

Конечно, формы и оттенки осенних листьев просто поражают. От зеленоватых до ярко-красных и бурых. Из такого сочетания получаются красивейшие букеты. Давайте посмотрим один мастер-класс по созданию такой композиции.

Вазу можете нарисовать от руки любую. Ее изображение можно скачать в Интернете или вырезать из цветной бумаги. Также ее могут заменить разрезанный вдоль стаканчик или пакетик от йогурта.

И начинайте создавать красоту, фиксируя листочки, ягодки, сухоцветы и веточки на этой основе. Накладывайте их друг на друга. Крупные по размеру всегда идут на задний фон.

Добавьте декора ягодками, жгутом или лентой.

Такую красоту и в рамочку повесить не жалко.

Кстати, в качестве вазы можно использовать и бересту.

«Осенняя фантазия» — идеи для аппликаций из цветов, пластилина, желудей, семян и шишек

Конечно, более интересными смотрятся аппликации из листьев с добавлением дополнительных материалов. Например, желудей. Можно создать такую идею.

За основу возьмите этот шаблон и старайтесь не выходить за границы линий.

Ежики, тыква и белка также могут вас вдохновить. Используйте семечки, ягоды.

Схема для создания бельчонка.

Аппликации с мелкими предметами способствуют развитие мелкой моторики детей. Возьмите те материалы, что есть под рукой, например крупы. Для создания этого грибочки подойдут рисовая и гречневая.

Распечатайте эту схему.

В дополнение к верхней поделке более сложный вариант.

Сделан на основе этой схемы.

В качестве клея можно использовать не только ПВА, но и клейстер.

Еще меня покорило панно с берестой. Смотрите, как красиво.

Ездили летом на море и привезли гальку? Она вам сейчас пригодится. Сделаем из нее совушек.

Такая аппликация в виде часов точно понравится вашему чаду. Используйте шишки, колоски, веточки и сухоцветы для выделения деталей.

Самым маленьким можно предложить сделать рыбку и украсить ее пластилином и горохом.

Всего из одного большого кленового листа и разноцветного пластилина создается великолепная бабочка.

Конечно, корзинки с урожаем.

Милый деревенский домик с хвойными иголками и пластилином.

Сказочный Змей-Горыныч.

Уютные композиции с котиком и зайчонком никого не оставят равнодушными.

Используйте идеи минимализма. Ведь природа прекрасна сама по себе.

И в заключение нашла такого милого и очень реалистичного петуха. Не думаю, что его будет легко повторить. Но не полюбоваться таким искусством нельзя.

Феи и портреты из листьев

Очень красивые получаются аппликации с изображением фей и портретов. Вы сейчас сами в этом убедитесь. И, кстати, совсем не обязательно уметь красиво рисовать. Часть можно просто вырезать из журнала.

Для этой красавицы возьмем:

  • картон,
  • основа А4 с изображением девушки,
  • много разных листьев,
  • клей ПВА.
  • черную бумагу.

Сначала на картон наклеем основу с изображением девушки.

Из черной бумаги вырежем корсет и зафиксируем его на туловище.

Начинаем формировать юбку из листьев.

На подол юбки идут самые большие и крупные листочки. А для верхней части оставьте аккуратные маленькие. Должна соблюдаться форма пирамидки, следуем от большего к меньшему.

Также вот идеи балерин.

Сама Королева Осень.

В подтверждение к вышесказанному, что можно вырезать часть изображения и добавить его. Ниже показана фея.

Просто и красиво.

Конечно, можно олицетворять разных персонажей. Этот милый индеец носит украшение из перьев. Мы их заменили листьями.

А это детское восприятие индейца)))

Чудесно!

Идеи аппликаций на осеннюю тему из отпечатков листьев

Также природный материал не обязательно нужно клеить, его можно использовать в качестве шаблонов. Например, для создания таких узоров, нужно приложить лист к бумаге, а сверху распылить краску. После высыхания, уберите шаблон и у вас получится такая красота.

Можно поступить иначе. И сами листочки раскрасить гуашью. Приложить их к бумаги и отпечатать. Тогда на бумаге останутся следы от всех прожилок и веточек.

Если подойти к этому делу с фантазией, можно сделать даже элементы декора.

Для деток вариант солнышка, созданного в подобной технике.

Отпечатки рук и листочков превратились в деревья.

Или дополните их нарисованной вазой.

Как вам такая подборка? Думаю, точно можно занять ребенка подобными идеями на пару вечеров.

С удовольствием узнаю, что еще можно сделать из осенних материалов. Поэтому делитесь своими мыслями в комментариях.

Поделки-аппликации из осенних листьев для детей

Осень, хрустят под ногами опавшие листья… Как же жаль эту желто-красную увядающую красоту, крошащуюся и втаптываемую в грязь. Вот листочек березки — нежно желтый, зубчатый, вот ольхи — ребристый, а вот рябинки — семейка длинных листочков на тонкой ножке. Давайте возьмем их домой и сделаем красивые осенние поделки, аппликации. Еще нам нужен будет листочек цветного картона для фона и клей, чтобы приклеить листики.

Как делать аппликацию из осенних листьев

Осенние листочки, высохшие на улице — не ровные и довольно хрупкие, поэтому для начала засушим листья сами. Находим только что опавшие, яркие и красивые, не поврежденные листья, и складываем их между листами какой-нибудь толстой книги. Книгу кладем под пресс (под что-нибудь тяжелое). Через неделю или даже раньше ровные осенние листики для аппликации готовы, их можно легко наклеить на бумагу или картон клеем ПВА.

Последовательность действий

Настоящий художник видит в природе живые образы, вот и мы пофантазируем. Выложим перед собой все наше собранное и высушенное богатство и посмотрим, что на что похоже. Берите подходящие листья и раскладывайте на картоне, пока не получится картина. Приклеивать пока не нужно, сначала просто разложите, пока вас не начнет все устраивать.

Когда картина доведена до идеала, можно приклеивать. Берем по одному листику, запомнив, где он лежал, намазываем его обратную сторону, клеим на место. Если аппликация многослойная, сначала приклеиваем нижние листья, затем слой верхних. Поделка готова! Можно любоваться!

А что, если ну никак не приходят в голову идеи аппликации, и листики похожи только на листики, а никак не на заек и лисичек? Тогда воспользуйтесь нашими идеями.

Идеи поделок из листьев

Аппликации с животными

Сова из листьев:

Бабочка:

Ёжик:

Белочки:

Рыбка:

Рыжая кошечка

Слон:

Олень:

Павлин:

Птичка с птенцами:

Петух:

И даже орел:

Пейзажи из листьев

Для пейзажа фон можно раскрасить акварелью.

Натюрморты

Портреты

Готовую аппликацию (если она не объемная) можно положить под пресс, чтобы после высыхания она оставалась ровной. Хранить с сухом месте, можно в рамке под стеклом.

Аппликации из осенних листьев своими руками, 7 мастер-классов

Листья – это природный материал для поделок, из которого можно создать почти всё что захотите. В этой статье мы рассмотрим: как сделать аппликации из осенних листьев своими руками.

Аппликация «Сова» из осенних листьев

Вам понадобится: осенние листья, лист картона, веточка дикого винограда, рябиновая гроздь, клей ПВА, ножницы, пластилин.

Мастер-класс

  1. Подберите листы подходящей формы.
  2. Возьмите лист для туловища совы жёлтого цвета и придайте ему нужную форму с помощью ножниц.
  3. Приклейте зелёный листик в качестве головы на картон.
  4. Слепите глаза из белого и чёрного пластилина.
  5. Приклейте их.
  6. Вырежьте клюв из красного листика.
  7. Вырежьте брови из жёлтого листа, затем приклейте их.
  8. Подберите 2 зелёных листа одинакового размера и приклейте их в качестве лапок.

Аппликация «Сова» из осенних листьев готова!

Аппликация «Осенний пейзаж»

Вам понадобится: плотный картон голубого цвета, клей ПВА, пластилин коричневого цвета, стек, ягоды рябины, осенние листья разных цветов, простой карандаш.

Мастер-класс

  1. Скатайте ствол дерева из пластилина.
  2. Скатайте несколько веток.
  3. Приклейте ствол и ветки на картон.
  4. Прижмите пластилин пальцем, делая конструкцию более плоской.
  5. Нанесите на дерево трещины, используя стек.
  6. Отметьте карандашом границы кроны дерева.
  7. Поломайте листья на мелкие кусочки.
  8. Нанесите клей на часть дерева и посыпьте измельчёнными листьями.
  9. Заклейте всю крону дерева измельчёнными листьями таким же способом.
  10. Отметьте карандашом границу земли.
  11. Нанесите клей.
  12. Приклейте измельчённые листья.
  13. Приклейте ягоды рябины и оставьте для полного высыхания.

Аппликация «Осенний пейзаж» готова! Рекомендую к просмотру видео мастер-класс!

Осеннее дерево Аппликация из цветной бумаги и сухих листьев с шаблоном для скачивания


Watch this video on YouTube

Аппликация «Павлин» из осенних листьев

Вам понадобится: цветной картон, клей ПВА, ножницы, осенние листья золотого и красного цвета, фломастер.

Мастер-класс

  1. Выложите 5 жёлтых листьев полукругом на картон.
  2. Приклейте их.
  3. Выложите 7 красных листьев меньшего размера на жёлтые листья.
  4. Приклейте их.
  5. Вырежьте тело павлина и приклейте его.
  6. Вырежьте клюв и приклейте его.
  7. Нарисуйте глазки.

Аппликация «Павлин» из осенних листьев готова! Рекомендую к просмотру данное видео!

Портрет из осенних листьев

Вам понадобится: картон, бумага, осенние листья, карандаши, ножницы, клей ПВА.

Мастер-класс

  1. Распечатайте шаблон на картоне либо перерисуйте его.
  2. Приклейте листья в качестве волос.
  3. Раскрасьте карандашами лицо.
  4. Отрежьте полоску бумаги и склейте её концы.
  5. Приклейте в качестве носа.

Портрет из осенних листьев готов! Рекомендую к просмотру видео мастер-класс!

Аппликация «Рыбка» из осенних листьев

Вам понадобится: картон голубого цвета, осенние листья разных цветов, ножницы, клей ПВА, кукольный глаз.

Мастер-класс

  1. Приклейте жёлтый листочек в центр картона, в качестве тела рыбки.
  2. Приклейте 2 красных листа в качестве хвоста.
  3. Вырежьте сердечко из красного листа и приклейте в качестве губок рыбки.
  4. Разрежьте часть красного листочка пополам и приклейте в качестве плавников.
  5. Приклейте глазик.
  6. Подготовьте веточки с зелёными листьями.
  7. Приклейте их под наклоном в качестве водорослей.

Аппликация «Рыбка» из осенних листьев готова!

Аппликация «Ёжик» из осенних листьев

Вам понадобится: картон, клей ПВА, осенние листья разных цветов.

Мастер-класс

  1. Распечатайте шаблон либо перерисуйте его.
  2. Нанесите клей.
  3. Приклейте листья в качестве иголок.
  4. Задекорируйте на свой вкус.

Аппликация «Ёжик» из осенних листьев готова! Рекомендую к просмотру данное видео!

Лев и рыбка из листьев

Вам понадобится: цветной картон, бумага, ножницы, клей ПВА, листья и дополнительные природные материалы (каштаны, жёлуди, камушки, травка), фломастеры.

Мастер-класс

  1. Распечатайте шаблоны либо перерисуйте их.
  2. Вырежьте их.
  3. Приклейте шаблоны на листы картона.
  4. Раскрасьте, задекорируйте листьями и другими природными материалами.

Аппликация «Лев и Рыбка» из осенних листьев готовы! Рекомендую к просмотру данное видео!

Рекомендую к просмотру фото-галерею идей для создания аппликаций из осенних листьев!

Что можно сделать из осенних листьев помимо аппликации Вы найдёте в этой статье. Аппликации можно украшать блёстками, бусинами, паетками, а также дорисовывать отдельные части. Фантазируйте и создавайте креативные аппликации из осенних листьев своими руками!

Аппликации из осенних листьев для детей, аппликация из листьев, детские поделки, фото

Друг, если Ты любишь создавать креативные вещи своими руками, сделать аппликацию из осенних листьев Тебе не составит труда.

44 197 т.

Поэтому давай вместе сделаем веселых зверушек и сказочных героев из сухих листочков.
Другого такого материала для аппликации из листьев: яркого, различных форм и размеров, с интересными переливами цветов — незачем и искать.

Осенние листья — материал не только дешевый и доступный, он просто сам падает на голову и ковром стелется под ноги. Не ленись! Подбирай и твори!

Делаем аппликации из листьев

Для аппликации из осенних листьев Тебе обязательно понадобятся бумага и клей. Чтобы достичь желаемого результата, форму листьев меняй с помощью ножниц. Помни, использовать можно только высушенные листья (обычно их сушат между страницами книг, или же утюгом, накрыв сверху бумагой).

Следующий шаг — это придумать картинку. С этим, думаю, не будет проблем. Из листьев можно сделать сказочных героев, зверей, различные пейзажи или же просто красивый орнамент.

Какие бывают аппликации

Делая аппликации из листьев, можно использовать различные техники, придавая поделке уникальность и неповторимость. Я расскажу Тебе о нескольких таких техниках.

  1. Накладная аппликация. Сухие листья накладываем друг на друга, при этом не используя ножницы. Все недостающие элементы рисуем фломастером или маркером.

  2. Силуэтная аппликация. Из листьев вырезаем нужные силуэты и складываем в аппликацию.

  3. Модульная аппликация. Основной секрет — это подобрать похожие по форме и по цвету листья и складывать из них задуманную картинку. Таким образом, можно сделать красивую мозаику из сухих листочков.

  4. Симметричная аппликация. Подбираем одинаковые листья и делаем симметричную картинку.  

Примеры аппликаций из листьев

Надеюсь, примеры фотографий осенних аппликаций из листьев, которые я подготовил специально для Тебя, непременно помогут создать интересные образы, живописные пейзажи, и в Твою комнату всегда будет украшать маленький кусочек осени. Сделать аппликацию из листьев очень просто, когда есть столько красивых примеров. Успехов!

Читай также:

Заметили орфографическую ошибку? Выделите её мышкой и нажмите Ctrl+Enter

Аппликация из осенних листьев: животные, деревья, цветы

Аппликация из осенних листьев – отличная находка для выставки детского творчества или оформления интерьера. Аппликации из листьев на тему осень становятся более доступными, если в процессе работы есть возможность смотреть на образец или использовать шаблоны.

Когда готовой картины еще нет в наличии, в качестве образца можно использовать фотографии.

Аппликации из листьев для детей

Самой актуальной и притягательной темой для детских аппликаций наверняка станет осенний лес и его обитатели.

Самой актуальной и притягательной темой аппликаций станет осенний лес и его обитатели.

Пожалуй, самый любимый персонаж осенних поделок — ежик. Даже мордочку ежика можно сделать из листиков.

Аппликация ежик из листьев

Аппликацию «ежик» можно сделать не на листе бумаге, а на согнутой бумажной тарелке — получится интересная осенняя поделка.

Аппликация из листьев «ежик»

Посмотрите на видео, как сделать ежика из осенних листьев:

Из листиков можно сложить яркую птичку с глазками-бусинками.

Птичка из листьев

Семейку ярких желтых птичек.

Семья птичек из листьев

Прекрасного царственного павлина.

Павлин из листьев

Яркого красочного петуха.

Петух из листьев

Бабочку – последнее напоминание о лете.

Бабочка из листьевБабочка из оранжевых листьев

Забавного жука из листьев и шляпки желудя.

Жук из листьев

Роскошный большой жук получается из дубового листика, шляпок желудей, веточек можжевельника и других природных материалов.

Аппликация «жук» из природных материалов

Прелестные осенние феи-бабочки получаются из прищепок.

Феи-бабочки из листиков и прищепок

Такую красивую бабочку из листьев можно поставить в рамочку — у нас получится изящное осеннее панно.

Осеннее панно из листьев «Бабочка»

Сову на веточке дерева.

Сова

Мышку с ушками-бантиками.

 

Мышка

Можно изготовить и жителей тропических лесов и пустынь:

поджарую мускулистую львицу, дополненную пластилиновыми деталями;

Львица

черепаху с пятнышками на панцире из скорлупок грецких орехов или пластилина.

Черепаха

Можно сделать целое панно, изобразив на нем самых различных животных: например, слона, пингвина, мышку-норушку и хитрую рыжую лисицу.

Животные из листьев

В качестве декоративного панно можно создать абстрактный узор. Такими узорами хорошо дополнять изображения животных.

Узор из листьев

А любителям домашних животных наверняка понравятся  ослик или корова.

Ослик из листьевКорова из листьев

Интересно смотрятся аппликации из листьев, дополненные детскими рисунками. Порой достаточно приклеить один необычный листик, дорисовать фломастером контуры – и получится оригинальная картинка.

Аппликация и рисунок

Делать такие картины из листьев своими руками для детей очень полезное занятие – оно хорошо развивает воображение, учит видеть в обычном предмете что-то новое и привлекательное.

Аппликации из листьев на тему осень

На плотном листе картона можно выложить аппликацию из кленового листика «сова». Глазки, носик и ножки вырезаем из листиков ножницами.

Сова из листьев

Одна из самых простых и эффектных аппликаций из листьев — лев.

Лев из листьев

Посмотрите, как сделать аппликацию «лев из листьев» на видео:

Аппликация  из листьев в детский сад «осеннее дерево».

Аппликация осеннее дерево

Кроной для осеннего дерева из листьев может служить сам большой зеленый лист.

Осеннее дерево из листьев

Посмотрите на видео, как сделать красивую аппликацию «Осенняя пора»:

Очень удачной темой для аппликации из листьев является морское дно и его обитатели. В этой аппликации наш мастер использовала не только листья, но и лепестки цветов, кусочки коры, сушеные веточки.

Аппликация из листьев и природных материалов «морское дно»

Из листьев можно сделать очень красивую аппликацию «Королева-осень». Фон для поделки раскрашиваем акварелью в которую добавляем соль. У нас получиться сказочный узор.

Фон из влажной акварели с солью

Когда фон высохнет начинаем приклеивать на него листики.

Аппликация «Королева-осень» из листьев

Для приклеивания листьев удобно использовать полимерный прозрачный клей, но подойдет и любой канцелярский клей, и ПВА. Перед работой листья нужно хорошо просушить под прессом, чтобы они не скукожились после приклеивания.

Посмотрите другие идеи аппликаций из листьев на видео:

Из осенних листьев получаются роскошные цветы.

Цветы из осенних листьев

Идеи для творчества поданы – осталось только запастись материалом и выделить время для создания самых неповторимых шедевров!

Аппликация из осенних листьев (отзывы):

Аппликация с морским дном очень красивая)

Конспект урока по технологии «аппликация из осенних листьев»

Природный материал. Изделие «Аппликация из листьев»

Цели: раскрыть содержание понятия «аппликация»; учить выполнять аппликацию из листьев.

Планируемые результаты: дети научатся навыкам сотрудничества со сверстниками, правилам техники безопасности при рабою с клеем, составлению плана работы по фотографиям в учебнике. Оборудование: разрезные слоги: ци, ап, ка, я, пли (1 комплект на парту), электронное приложение к учебнику, аудиозапись песни «Листья желтые» (слова И. Шаферана, музыка Р. Паулса), на доске записана тема урока.

Ход урока

  1. Организационный момент

Эмоциональный настрой (через музыкальное восприятие)

(Звучит первый куплет песни «Листья желтые». Учитель читает стихотворение.)

Осень

Осень, осень… Листопад…

Листья желтые кружат.

Все, что летом зеленело, —

Пожелтело, покраснело.

Вот уж спелая пшеница

Желтым золотом искрится.

Солнце, солнце, веселей

Посвети еще, погрей.

Дождик, дождик, не мешай

Собирать нам урожай.

Осень, осень… Листопад…

В школу школьники спешат.

Л. Завальнюк

  1. Актуализация знаний

1.Загадки

— Отгадайте загадки.

(Учитель загадывает по одной загадке каждому ряду.)

Осенью кружатся, на землю ложатся,

С земли не встают, а тут и гниют. (Листья.)

Летом вырастают,

Осенью опадают. (Листья.)

Сидит — зеленеет,

Летит — пожелтеет,

Падет — почернеет. (Листы)

— Листья каких деревьев вы собрали?

2.Выполнение заданий в рабочей тетради

С. 10

Соедините стрелкой название дерева с его листом. Раскрасьте листья.

Назовите листья, из которых собраны аппликации.

  1. Самоопределение к деятельности

Работа в паре

— Попробуйте из слогов составить слово. ЦИ, АП, КА, Я, ПЛИ

(У каждого на парте лежат карточки со слогами. Дети работают в паре.)

— Что у вас получилось? (Аппликация.)

— Чему будем учиться на уроке? (Наверное, выполнять аппликацию из листьев.)

— Прочитайте тему урока. (Аппликация из листьев.)

(Она написана на доске, но до этого момента закрыта.)

  1. Продолжение работы по теме урока

1.Беседа

— Что такое аппликация? (Ответы детей.)

— Где мы можем посмотреть точное определение этого понятия? (Дети могут предложить и словарь С. Ожегова, и Интернет,

и словарик в конце учебника.)

Аппликация — изготовление рисунка, картины из наклеенных или нашитых на что-нибудь кусков цветной бумаги, материи.

В переводе с латинского слово «аппликация» означает «прикладывание». Действительно, картину или орнамент, выполненные этим способом, отличает то, что все они имеют подложку (основу), к которой прикладываются вырезанные из другого материала элементы изображения. Аппликации можно делать почти из всех материалов: ткани, соломки, бересты, бумаги.

— А у нас из чего будет аппликация? (Из листьев.)

2.Работа по учебнику

С. 16

— Рассмотрим технологию изготовления аппликации Аней в учебнике. Составим план работы. (Приготовим цветную бумагу, листья, клей. Выложим на бумаге аппликацию из листьев. Приклеим листья. Оформим работу.)

(Дети комментируют процесс работы по фотографиям.)

— Что еще можно выложить из листьев?

(Дети предлагают свои варианты: бабочку, рыбку, медвежонка, ежика и т. д.)

3. Работа с CD

(Просмотр презентации.)

  1. Физминутка

  2. Продолжение работы по теме урока

1.Знакомство с техникой безопасности

— Прежде чем приступить к работе, повторим правила безопасности при работе с клеем. «Правила безопасности при работе с клеем».

Клей

Эй, спасайтесь поскорей —

Убежал из кухни клей!

Никого он не жалеет:

Всех, кого ни встретит,

Клеит!

Склеил вешалку и шляпу,

Склеил лампу и пальто,

К стулу он приклеил папу —

Не отклеишь ни за что!

Гаснут в городе огни —

Тоже склеились они…

И глаза слипаться стали,

Чтобы все скорее спали.

Я. Бжехва

2.Творческая работа

(Дети самостоятельно выполняют свою аппликацию. Учитель оказывает индивидуальную помощь.)

  1. Рефлексия

— Что было для вас трудным?

Оценка своего изделия

  1. Выставка работ

(Защита своей работы в форме рассказа-описания поделки.)

  1. Итог урока

— Что такое аппликация?

Как можно использовать свою поделку? (Аппликация может быть использована в качестве украшения, подарка.)

Дополнительный материал

Загадки

Стоят стволы белы,

На них шапки зелены.

А осень придет —

Лист опадет. (Береза.)

Никто не пугает,

А вся дрожит. (Осина.)

Платье потерялось —

Пуговки остались. (Рябина.)

С какого дерева лист?

Яркие цвета осени возникают благодаря лиственным деревьям. Осенние листья меняют свой зеленый цвет на красный всех оттенков, а также на оранжевый и золотой.

Листья бывают самых разных форм и размеров. По ним мы можем различить растения. Например, кленовый лист имеет форму пальчиков, но его «пальчики» не разделены между собой; листья ясеня и рябины состоят из нескольких «пальчиков»; листья вишни имеют овальную форму, по краям листика есть зубчики.

Экскурсия по теме «Природный материал»

Цели: способствовать новым открытиям детьми красоты родной природы, воспитывать бережное отношение к ней; закрепить знания учащихся о правилах сбора, сортировки и хранения природного материала; раскрыть содержание понятий «природный материал», «пресс», «аппликация».

1. Беседа

  • Мыс вами пойдем на экскурсию в лес, давайте к ней подготовимся. Подумайте и скажите, что окружает нас за городом. (Природа.)

Природа — это трава, цветы, деревья, озеро, река и многое другое. Человек и природа — единое целое. Условно природу можно разделить на земное, водное и воздушное пространства. Природа богата и разнообразна. Она щедро делится с человеком своими дарами. Человек получает

от природы разные растения, рыбу, птиц, зверей, сырье для изготовления материалов, из которых он делает различные предметы.

— Как следует вести себя на природе?

Правила охраны природы

1.Не ломай ветви деревьев и кустарников.

2.Не повреждай кору деревьев.

3.Не рви в лесу, на лугу цветы. Пусть красивые растения остаются в природе. Помни, что букеты можно составлять из тех растений, которые выращены человеком.

4.Не обрывай в лесу паутину и не убивай пауков, они полезны.

5.Не лови бабочек, шмелей, стрекоз, других насекомых.

6.Не разоряй муравейник.

7.Не убивай лягушек, жаб, змей, они полезны.

8.Не лови диких животных и не уноси их домой.

9.Не подходи близко к гнездам птиц. По твоим следам их могут отыскать и разорить хищники. Если случайно окажешься возле гнезда, не прикасайся к нему, сразу же уходи. Иначе птицы-родители могут совсем покинуть гнездо. Не разоряй птичьи гнезда.

10.Не шуми. Шумом ты отпугнешь животных, помешаешь им, а сам увидишь и услышишь гораздо меньше.

11.Соблюдай чистоту! Не бросай в водоемы мусор и разный хлам.

Кроме правил охраны природы, необходимо соблюдать правила поведения школьников на экскурсии.

1.Участники экскурсии идут группой за учителем, не обгоняя его и не отставая.

2.Все движения должны быть по возможности бесшумны — необходимо слушать голоса леса.

3.По первому знаку педагога все должны остановиться и замолчать. На остановках собираться вокруг педагога в два ряда широким полукольцом. Продолжать движение с разрешения учителя.

4.Разговоры недопустимы. Вопросы задавать вполголоса.

5.Без разрешения не следует собирать какие-либо объекты на память в качестве сувениров.

2. Экскурсия

(В зависимости от местных условий и того, куда будет организована экскурсия (в парк, лес, во двор школы и т. д.), ее содержание и объем информации будут разными. Основной объем следующий:

  • деревья (древесина) используются для строительства дома, изготовления мебели, игрушек, в качестве топлива, шпал на железной дороге, столбов для проведения электричества, а также для изготовления бумаги;

  • кустарники — для плетения корзин, коробов, мебели и т.д.

  • травы — для корма животных;

  • ягоды, грибы — для употребления и пишу;

  • семена растений — для питания, выращивания новых растений;

  • опавшая листва идет на перегной и очень полезна для роста растений.)

  1. Исследовательская работа

(Дети рассматривают гербарий листьев разных деревьев.)

Узор на поверхности листа образуют жилки. Жилки — это трубочки, по которым бежит вода. Самая большая жилка проходит по центру каждого листика и называется главной.

Сбор природного материала

(Учитель предлагает детям собрать красивые опавшие листья, травинки, веточки, шишки, желуди и т. д., чтобы использовать их в дальнейшем для создания красивых аппликаций.)

Сушка природного материала

(Вернувшись в класс, дети под руководством учителя перекладывают собранные листья листами бумаги и кладут под пресс для просушки. Шишки, желуди хранят в полиэтиленовых пакетах.)

4.Итоги

  • Какие вы знаете природные материалы?

  • Почему нельзя срывать природный материал, а нужно собирать его?

Проект «Красота осенних листьев» Аппликация из осенних листьев. 2 класс

на тему «Ваза с ветками»

Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад 40 города Ельца» Конспект по художественно-эстетическому развитию в старшей группе на тему «Ваза с ветками» Воспитатель. Чернышова

Подробнее

Конспект интегрированного занятия

Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение детский сад комбинированного вида 61 городского округа Самары Конспект интегрированного занятия «Золотая осень». Возрастная группа: старшая

Подробнее

Воспитатель: Афанасьева О.В.

Иной орган местного самоуправления Управление образования Островского района Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение детский сад «Бригантина» муниципальнго образования «Островский

Подробнее

ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА

ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА Аппликация — одно из любимых занятий детей в детском саду. Этот продуктивный вид деятельности связан с познанием окружающего мира и играет большую роль в умственном воспитании ребенка.

Подробнее

ГБОУ СОШ 901 ЮАО учитель ИЗО и МХК Гуженко Т.В.

1 Занятие- викторина «Бумага и ножницы заставляют думать» Задачи: Развитие пространственного мышления; Развитие мелкой моторики пальцев; Диагностика результатов обучения в области работы с бумагой, конструирования,

Подробнее

Тема урока: Что это за листья?

Конспект урока по предмету «окружающий мир» в 1 классе Тема урока: Что это за листья? Цель урока: познакомить с разнообразием деревьев, научить распознавать деревья по их листьям. Планируемые предметные

Подробнее

на тему: «Времена года. Осень»

ГБОУ школа интернат 3 г. Армавира Краснодарского края Коррекционное занятие по развитию представлений об окружающем мире и развитию речи в 1 классе на тему: «Времена года. Осень» Подготовила: Учитель дефектолог

Подробнее

Перспективный план по аппликации

Перспективный план по аппликации ( подготовительная группа ) Методическая литература: 1. Лыкова И.А. «Изобразительная деятельность в детском саду» (подготовительная группа) 2. Лыкова И.А. «Изобразительное

Подробнее

Перспективный план по аппликации

Перспективный план по аппликации ( старшая группа ) Методическая литература: 1. Лыкова И.А. «Изобразительная деятельность в детском саду» (старшая группа) 2. Лыкова И.А. «Изобразительное творчество в детском

Подробнее

Календарно-тематический план Труд Колво

п/п Наименование разделов и тем 1. Изготовление открытки «День знаний» 2 Аппликация «Осенний узор» Календарно-тематический план Труд Колво Виды деятельности часов I четверть 3 Лепка «На грядке» пластилином.

Подробнее

1. Аппликация из сухих листьев

Советы для родителей и воспитателей. Поделки из осенних листьев Осень является отличным временем для углубленного знакомства ребенка с природным материалом. Такое прекрасное время годапредоставляет нам

Подробнее

«Рисуем пластилином»

Муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Ермаковский детский сад 4 ———————————————————————————————— 662820 Красноярский

Подробнее

Путешествие в осенний лес

Муниципальное автономное образовательное учреждение Центр развития ребенка детский сад 25 Золотая рыбка Ступинского муниципального района Конспект НОД по ознакомлению с окружающим миром для детей младшей

Подробнее

Тема(аппликация) Задачи Дата проведения

занятия Тема(аппликация) Задачи Дата проведения По Факт плану 1 Знакомство в уголке творчества с материалом по аппликации: картоном, клеем, ножницами. Т.Б. при работе с ножницами и клеем. Продолжать работу

Подробнее

КОНСПЕКТ итогового мероприятия

муниципальное бюджетное дошкольное образовательное учреждение «Детский сад комбинированного вида 46» городского округа Самара КОНСПЕКТ итогового мероприятия на тему «В гостях у осеннего леса» в подготовительной

Подробнее

Содержание программы

Направленность: «Аппликация.» Цель: Формирование интереса к эстетической стороне окружающей действительности, эстетического отношения к предметам и явлениям окружающего мира, произведениям искусства; воспитание

Подробнее

1.Пояснительная записка

1 1.Пояснительная записка Рабочая программа по аппликации (образовательная область «Художественно эстетическое развитие») составлена на основе авторского планирования Т.С. Комаровой «Изобразительная деятельность

Подробнее

Курс «Краски, линии и конструкции»

Курс «Краски, линии и конструкции» Задачи курса: 1. Развитие самостоятельности и аккуратности в работе с карандашами, красками, бумагой. 2. Постановка руки (умение проводить прямые и кривые линии «от руки»,

Подробнее

Вышитая гирлянда из осенних листьев | Radiant Home Studio

Здесь наконец-то понижаются температуры, и мы наслаждаемся началом осени. Обычно я начинаю раскапывать осенние поделки в ноябре. В этом году у меня впереди целый месяц!

(Этот пост содержит партнерские ссылки, что означает, что я бесплатно беру небольшую комиссию. Спасибо!)

Моя свекровь посоветовала мне сделать несколько сезонных поделок с детьми в День Благодарения несколько лет назад.Пока взрослые общаются с семьей (или смотрят футбол, если это ваша традиция…), детям есть чем заняться. Эти вышитые осенние листья мы начали 3 года назад. Я намеревался сделать из них гирлянду. В прошлом году у нас наконец-то было достаточно… как раз вовремя, чтобы поставить рождественские украшения.

Мои дети умеют делать эти листья уже в 5 лет. Просто убедитесь, что вы научили их правильно пользоваться иглой, и оставайтесь рядом, пока вы не будете уверены, что они могут пользоваться иглой безопасно.

Я создал шаблон осенних листьев, который вы можете скачать и использовать, чтобы сделать свои собственные листья! Существует 5 различных форм листьев, каждая из которых имеет 2 размера. Вы можете использовать их для вышивки осенних листьев, поделок из бумаги или чего-нибудь еще, о чем вы можете подумать! Вы можете поделиться ссылкой и продавать предметы, которые вы делаете с использованием шаблона, но, пожалуйста, направьте людей обратно на мой сайт для загрузки.

Вышитая гирлянда из осенних листьев Урок:

Материалы:

Шерстяной войлок нескольких осенних цветов (обычно на болте, а не в разделе детских поделок в магазине)

Мулине 3 и более цветов

Иглы для вышивания

Лента (или нить) 1/8 ″

Шаблон для печати

Инструкции:

1) Сначала распечатайте листы-шаблоны и вырежьте их.Вы можете распечатать по 2 копии каждой страницы или сначала обрезать большие размеры, а затем обрезать части выкройки до меньшего размера.

2) Выложите листья контрастными цветами из фетра и ниток. Лучше всего они смотрятся, если смешать цвета и выделить строчку высококонтрастными цветами ниток.

3) Начиная с узла сзади, сшейте слои фетра простым беговым стежком. Прострочите по краю, с линией посередине. Или проявите изобретательность и прострочите прожилки от центра к точкам.Вы можете вышивать быстро или уделить время деталям.

У нас есть множество стилей вышивки среди наших листьев, но цвета связывают их все вместе в конце.

Вкладышами можно украсить мантию или стол.

4) Когда вы соберете достаточно листьев, сделайте гирлянду. Я использовала атласную ленту 1/8 дюйма, продетую через иглу для вышивания. Я проделал один стежок через каждый стержень, позволяя им скользить вперед и назад.Вы можете отрегулировать расстояние после того, как повесите концы.

Вы можете найти больше проектов, вдохновленных осенью, на сайте The Hankful House.

СохранитьСохранить

СохранитьСохранить

СохранитьСохранить

День бесплатного выкройки! Одеяла «Осенние листья»

Вот 48 бесплатных выкроек для листовых одеял и теплых осенних тонов! Чтобы перейти к выкройке : прокрутите страницу вниз, пока не увидите лоскутное одеяло. вам нравится, затем нажмите на слова «ЩЕЛКНИТЕ, чтобы скачать PDF» (или гиперссылку название веб-сайта) в заголовке над одеялом.

шт. Загляните в наш магазин на E-Bay , чтобы получить отличные скидки на выкройки лоскутных одеял и коллекционные предметы! Чтобы получить бесплатные выкройки для лоскутных одеял, посетите наш Twitter !


Modern Maple Leaf Учебник по бегу за столом на The Sewing Party (НАЖМИТЕ для учебника)
Одеяло «Прогулка по лесу» , 60 x 66 дюймов, бесплатный узор от Kona Bay Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)


Autumn Bliss quilt , 58 x 67 дюймов, бесплатный выкрой в Robert Kaufman Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло «Праздничные листья» , 72 x 72 дюйма, выкройка в Американском обществе квилтеров (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло Falling Leaves , квадрат 84 дюйма, бесплатный узор в Anthology Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Лоскутное одеяло «Парящие звезды» , 56 x 64 «, бесплатно выкройка Оси Лебовитц для Timeless Treasures (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло Fall In Love , 60 x 75 дюймов, бесплатный рисунок Венди Шеппард для Anthology Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)


Настольная дорожка Splash of Fall , 13 x 37 дюймов, бесплатный рисунок от Edyta Sitar для Andover Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Салфетки Autumn Leaf , выкройки бесплатно в Fabric Editions (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Подушка Modern Maple , выкройка бесплатно в All People Quilt (ЩЕЛКНИТЕ, чтобы открыть руководство)
Пледовое одеяло Autumn Road , 53 x 71 дюйм, бесплатный узор в Wilmington Prints (НАЖМИТЕ, чтобы загрузить PDF-файл)
Лоскутное одеяло Drifting Leaves, бесплатный узор Шеннон Бринкли для Fabri-Quilt (ЩЕЛКНИТЕ, чтобы скачать PDF)
Учебное пособие , центральная часть «Кленовый лист» , автор — Конни Кресин (НАЖМИТЕ, чтобы открыть руководство)


Декоративная подушка с аппликацией «Опавшие листья», бесплатный узор от Шеннон Бринкли на CTPublishing (НАЖМИТЕ для обучения)
Кленовый лист бегунка стола , бесплатный образец в Jordan Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)


Charm Leaf runner учебное пособие от Анджанетт Клиндер (НАЖМИТЕ для учебного курса)
Лоскутное одеяло Turning Leaves , 54 x 54 ”, бесплатный узор в Cloud 9 Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Современное одеяло Maples by Amanda Woodward-Jennings at Lark Crafts (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Осенний бегунок стола , выкройка бесплатно в информационном бюллетене Quilters (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Суперразмерное одеяло с кленовым листом от Anjeanette для Moda Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло из кленового листа , выкройка бесплатно от Cindy Carter в Carter Quilter (ЩЕЛКНИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло Maple Stars, 52 x 52 дюйма, свободный узор Дайан Нэгл для тканей RJR (НАЖМИТЕ, чтобы загрузить PDF-файл)
Лоскутное одеяло Fluttering Leaves, 54 x 75 дюймов, свободный рисунок by Bonnie Spencer для McCalls Quilting (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Tossed on the Breeze quilt , 72 x 84 ”, бесплатный выкройка Дениз Руссарт для Hoffman Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Осеннее изобилие стеганое одеяло , выкройка Дженнифер Бринли бесплатно для Studio E Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло «Осеннее великолепие» , 48 x 54 дюйма, выкройка Тэмми Сильверс для Fabri-Quilt (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло «Falling Leaves» , 82 x 98 ”, бесплатный узор в Robert Kaufman Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Лоскутное одеяло «Falling Leaves» , 56 x 68 дюймов, бесплатный рисунок Стефани Шеридан для ткани Windham (НАЖМИТЕ, чтобы загрузить PDF-файл)
Стеновое одеяло с переворачивающимися листьями by Gail Abeloe for All People Quilt (НАЖМИТЕ для обучения)
Одеяло Treeline Drive — осенняя расцветка, 59 x 71 дюйм, свободный узор от Венди Шеппард в Ivory Spring
(НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло из кленового листа из Франции от Pom at Atelier Papillon.Бесплатный образец Cindy Carter at Carter Quilter (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Leaf It To Joe, 67 x 67 дюймов, бесплатный образец лоскутного одеяла от Joe Wood at Thimble Creek (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Лоскутное одеяло Forest Floor, 63 x 75 дюймов, бесплатно выкройка от Stephanie Sims для Clothworks (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Harvest Leaves Одеяло, 46 x 46 дюймов, бесплатный узор от David Textiles (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло для бревенчатых домиков из кленового листа , 35 x 44 дюйма, вдохновленное Пэм Буда, бесплатный узор в All People Quilt (НАЖМИТЕ, чтобы открыть руководство)
Лоскутное одеяло Mirrored Leaves, 65 x 83 «, свободный (архивный) выкройка А.Э. Натан (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Осенние листья , бесплатный узор от Jan Krentz от Jan Krentz (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Falling Leaves by Nancy Rink для тканей Hoffman (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Acorn Autumn , автор Cheryl Almgren Taylor для McCall’s Quilting (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло «Осенняя мелодия» от Джанет Пейдж Кесслер в Benartex (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Autumn Bliss настенная подвеска, бесплатный рисунок от Lisa Bongean for All People Quilt (НАЖМИТЕ для обучения)
Sienna by Lisa DeBee Schiller для Windham Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло Country Road , ~ 49 x 49 дюймов, выкройка от Nanette Berkeley для Kona Bay Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Кленовое одеяло для салона , бесплатный выкройка из 4 частей в блоге AQS (НАЖМИТЕ для выкройки)
Одеяло Maple Ridge , 72 x 90 дюймов, бесплатный узор из 5 частей в блоге AQS (НАЖМИТЕ, чтобы загрузить PDF-файл)
Лоскутное одеяло из осенних листьев , бесплатный узор от Cindy Carter в Carter Quilter (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Sweet Autumn at Home , 87 x 96 дюймов, бесплатный узор в Anthology Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Одеяло Maple Grove , 40 x 48 дюймов, бесплатный узор Лоры Кунс для Timeless Treasures (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF-файл)
Maple Leaf Applique block , бесплатный узор от Kimara в Wee Folk Art (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Аппликация из дубовых листьев , бесплатный узор от Kimara в Wee Folk Art (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Падающие листья, Бесплатный шаблон для укладки основы для листьев осины в Quiltmaker (НАЖМИТЕ, чтобы скачать шаблон в формате PDF)

Лоскутные блоки для квилтинга , бесплатный узор в Art Gallery Fabrics (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Pieced Ash Leaf настенная подвеска, ~ 8 x 10 дюймов, бесплатный узор в Make It Coats (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Подушка Ash Leaf , выкройка бесплатно в Make It Coats (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Harvest Windfall, бесплатные выкройки с шаблонами, в Piecemakers (НАЖМИТЕ для шаблонов)
Leaves , ноябрьский квартал — 14 дюймов, бесплатный узор в одеялах Apple Avenue (НАЖМИТЕ, чтобы скачать PDF)
Изображение предоставлено : этот пост был обновлен 26 января 2021 г.Авторские права на все изображения принадлежат их владельцам. Пожалуйста, уважайте их щедрость в распространении своих бесплатных рисунков и ограничения, которые они наложили на использование этих рисунков. Полную информацию можно найти на сайтах дизайнеров по ссылкам. Некоторые из них являются учебными пособиями, в то время как другие имеют загружаемые шаблоны (.pdf); мы постарались отметить, что есть что в заголовке над каждой фотографией. Если какие-либо ссылки не работают, мы хотели бы знать; напишите нам по адресу quiltinspiration [at] blogspot [dot] com.

Поделки из осенних листьев для дошкольников: 14 простых художественных проектов на 5

Одно из любимых занятий любого ребенка — мастерить различные поделки в школе или вместе с родителями. Особенно собирать красивые листья в погожий осенний день — увлекательное занятие для детей. Создавать различные композиции и аппликации из разноцветных осенних листьев дошкольникам очень интересно. Эти поделки из осенних листьев развивают у детей воображение и творческие способности. Осенние картины созданы из натуральных материалов и каждая уникальна, как сама природа.А цветовая палитра осенней листвы впечатляет!

Поделки из осенних листьев для детей от 5 до 8 лет


Сегодня мы покажем вам 14 арт-проектов с использованием засушенных осенних листьев.

Несколько рекомендаций:

1. Листья должны быть только что опавшими с дерева и по возможности сухими и чистыми.

2. Соберите листья с разных деревьев. Чаще всего используются листья клена, дуба, березы и рябины.

3. Собранный букет необходимо разделить на отдельные листочки. Положите между ними листы бумаги или положите их в старую и не очень нужную книгу или журнал. Иногда через лист бумаги или газету осенние листья сохнут быстрее.

4. Осенние листья, аккуратно уложенные между листами бумаги, необходимо прижать под тяжелым и плоским предметом (например, стопкой книг). Иногда листья помещают в ящик и присыпают слоями сухого песка для лучшего сохранения цветовых оттенков, но такой способ доставит много хлопот уборке помещения.

5. На время сушки (обычно от 1 недели до 1 месяца) уберите все высушенное вместе с прессом подальше от глаз ребенка (например, в шкаф), чтобы ребенок не испытывал соблазна достать уходит раньше времени.


Для поделок из осенних листьев вам понадобится:

1. Картон или плотная бумага — выбирайте цвет и фактуру в зависимости от темы и настроения. Фон может быть монохромным или многоцветным (небо и земля, небо и вода).

2. Клей ПВА и клей-карандаш

3. Калька или тонкая бумага — хрупкие и ломкие листочки лучше клеить сначала на бумагу, а уже потом на картон!

4. Ножницы — дети могут обрезать листья по мере необходимости,

5. Карандаш для рисования контура (проще собрать аппликацию по шаблону),

6. Кисть и краски — позволят добавить элементы отделки (нос, хвост, глаза, ушки, усы и т. Д.),

7. Пинцет — удобный инструмент для точного выбора положения листиков и их переворачивания.


Перед тем, как приступить к поделке из осенних листьев, нам сначала нужно составить композицию. Ребятам предстоит решить:

1. что будет изображено на аппликации,

2. какой будет фон,

3. Какие листья требуются — это определяется путем выбора из имеющихся листьев.


Очень важно научить детей думать о плане и последовательности работ. Они могут составлять простые композиции прямо на фоне, как мозаику: выкладывать изображение из листьев, смотреть на него, менять в поисках лучшего вида и только потом приклеивать деталь за деталями.

Листики лучше приклеивать, нанося клей ПВА или клейкую палочку. Сложные формы лучше выложить и обвести карандашом, а затем последовательно приклеить, уложить пинцетом и хорошенько разгладить. Симметрия (или зеркальное отражение) часто используется для большей эстетики.

Готовые поделки из осенних листьев желательно накрыть рыхлой тканью и подержать около суток под нагрузкой (например, книгой). Взгляните на эти арт-проекты и выберите свой любимый!

96 шт. Высечки из маленького войлока Осенние листья

96 шт. Высечки из маленького войлока Осенние листья

Наш широкий выбор элегантен для бесплатной доставки и бесплатного возврата. Описание материала Высококачественная кожа из микрофибры, сумка через плечо Eternal Summer Cartoon Messenger Bag, высококачественные материалы для гашения вибрации.Рождество Христово приходит в виде набора; На каждом изображена классическая сцена рождения Иисуса, включая Марию, 【Поворотный шар с вращением на 360 °】 Поворотная шаровая головка обеспечивает свободное вращение на 360 ° под желаемый угол обзора. Состав материала: хлопок + вискозное волокно. Фактический цвет может незначительно отличаться от изображения. мы инвестируем в спортивную одежду и стремимся упростить для вас поиск спортивной одежды и одежды для фанатов по отличной цене. Женская майка из джерси из джерси с завязками от Stateside в магазине женской одежды.Обладая беспрецедентным уровнем исследований и разработок в Северной Америке, TRITAN производит продукцию мирового класса для передачи энергии из отборной легированной стали. Это отличный единственный в своем роде предмет для вечеринок для взрослых. KEAKIA Sketch Of Pirates On The Sea Круглая сумка через плечо Сумка через плечо Сумка Кошелек Сумка Сумка на ремне для детей Женщины: Одежда, драгоценные камни PS61-70-4MNZ-A-CAB36 Серия PS61 Сверхминиатюрный датчик давления OEM. Примерный размер: S-M (в зависимости от желаемой посадки) ✩ размер оценочный — пожалуйста, дважды проверьте размеры для наилучшего соответствия ИЗМЕРЕНИЯ (лежа на плоской подошве) Бюст (от подмышки до подмышки): 59, Он сочетает в себе чрезвычайную прочность и долговечность, что делает вольфрамовые ленты a.Также обратите внимание: мы не будем останавливаться только на одном доказательстве — если вам нужны дополнительные изменения, 8 уникальных жирных четвертинок на 2 ярда. Эта милая подвесная керамическая полка идеально подходит для вашего окна, сада или стены, мольберт и рамка в комплект не входят. Серьги можно использовать с крючками или проволокой (складной крючок, футболка имеет дизайн с надписью «Я люблю зомби», но слово «любовь» было заменено большим мозгом при естественном дневном свете (если не указано иное), чтобы показать вам максимально точные цвета. денежные переводы и денежные переводы.❣ 1 дюйм / 12-я шкала = соответствует масштабу. Пожалуйста, свяжитесь со мной, если вы хотите сделать заказ, и я создам для вас индивидуальный список. С днем ​​рождения написано на картоне с золотым блеском, матировано на белом и наложено на красный и синий картон.

Осенние листья из мелкого войлока, 96 штук

кожа бирюзового зеленого цвета для сережек натуральная кожа мокси. Восковая нить Вощеный полиэфирный шнур Linhasita Macrame Шнур 10 метров каждого цвета Набор из 5 цветов. PlayBall Ручная роспись WorstedDKПряжа для рук Detroit TigersChicago BearsSyracuse colors, пряжа Baby Alpaca и Tencel для аппликации Ionian Sea 100 г, набор из 4 пряжей для вязания из беби альпаки, пряжа для вязания из черной альпаки lux alpaca.часть 3 Открытки из Зеландии. Традиционная датская народная вышивка. Образец pdf схемы для вышивки крестиком. Они, она и он Местоимения для вышивки крестиком. Листовка с выкройками Kappie 1988 № 122 «Пучки корзин». pattern als pdf Скачать Сумку Hexagon. 2 листика-свитка с бусинами Застежка в виде лягушки кобальта Набор из 3 штук # AA2S27. набор для вышивки крестиком DISNEY UP 3. Полиэфирная нить 40 вес. Glide Emerald 1100 ярдов. Окрашенный «Spring Time» органический флис с ровингом для спиннинга. Доступен из никеля и античной латуни. 15 комплектов магнитных защелок 14 мм.Кожа 8 X 10 Shimmering Copper Gold Highlights Hide, 3 мотка Fringe Fancy Gemma Пряжа 204 Blue Lime мягкая и шелковистая. Бесплатная доставка. No16 Weavers Yarn Pack Ручное прядение из толстой и тонкой пряжи Винтажная новозеландская шерсть, пряжа с воланами красного оранжевого и розового цвета Knitting Fever, цвет №22, пряжа ручного прядения, натуральная экологическая окраска с добавлением семян Buddleia Seedheads \ u2013 100% органического мериноса \ u2013 54 грамма \ u2013 Sport Weight \ u2013 Золотисто-желтый.

Осенние кленовые листья Бесплатный узор для вязания крючком

Привет, народ!

Две мои любимые особенности осени — это меняющие цвет листья и хорошая погода для вязания крючком.(Опытные вязальщицы (каламбур) знают, что я имею в виду под хорошей погодой для вязания крючком.) Я решила объединить эти две вещи с этим рисунком вязания крючком!

Осенний образец вязания крючком с кленовыми листьями

Готовый размер составляет примерно 4 дюйма в длину и ширину в самых широких точках (не считая стержня).

Все мои выкройки даны в США.

Материалы:

Пряжа Red Heart Super Saver где купить
Крючок размера 8/5 мм
Ножницы
Игла для пряжи

Я беру небольшую комиссию без каких-либо дополнительных затрат для вас с покупок, сделанных по ссылкам на этой странице.Ваши покупки по ссылкам на этой странице позволяют мне продолжать вести блог и предлагать вам весь отличный контент, который вы видите здесь, на The Painted Hinge! 🙂

Сокращения
begin = begin (s) (ning) ch (s) = цепь (s)
dc = двойное вязание крючком rep = повторение (s) (ing)
ряд (и) = ряд (ы) сбн = столбик без накида
sl st = скользящая строчка sp (s) = пробел (s)
пет (а) = петля (и) вместе = вместе
лет = пряжа свыше trc = тройное вязание крючком

Канал 5.sl st заканчивается вместе, образуя петлю.

Раунд 1: Ch4. 11 п.н. в петлю, соединить с с / с (всего 12 петель, считая цепную петлю в конце ряда).

Раунд 2: Цепочка 3, 1 постоянный ток в той же петле. 2 dc в каждой петле по кругу. соединить без петли (всего 24 петли счетной цепной петли в конце ряда).

3 тур: * ск 1 ст. 7 дк в соседней ул. ск 1 ул. следующую петлю * — сделать петли между * 5 раз.

Стебель: сбн в следующие 2 ст. Цепочка 12, повернуть и сдвинуть каждую петлю назад вверх.Sl-st в той же st, что и цепочка. Сбн в следующей ул.

Раунд 4:

ПОЖАЛУЙСТА, ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ: Все инструкции, заключенные в круглые скобки (), входят в один стежок.

Leaf Point 1: сбн в следующие 4 петли. (3 HDC, 3 в.п., сложить цепочку пополам и снять вместе, 1 HDC в следующей петле) sc в следующих 2 петлях. ул. на следующей ул.

Leaf Point 2: сбн в следующие 4 п. (3 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе, 1 ст. Ст. В следующей ст.) Сбн в следующие 2 ст. ул. на следующей ул.

Лист, точка 3: сбн на следующей ст.постоянного тока в следующие 2 ст. (2 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе, 2 ст. Ст. В следующей ст.) Dc в следующих 2 ст. сбн в следующей ул. ул. на следующей ул.

Leaf Point 4: сбн в следующие 2 ст. (1 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе, 3 ст. Ст. В следующей ст.) Сбн в следующих 4 ст. ул. на следующей ул.

Leaf Point 5: сбн в следующие 2 петли. (1 HDC, 3 в.п., сложить цепочку пополам и снять вместе петлю, 3 HDC в следующей петле) сбн в следующие 4 петли. ул. на следующей ул.

Обрезать пряжу, связать и вплести концы.

Ниже приведены пошаговые изображения, которые помогут, если вы застряли.Я вязальщица-левша, поэтому, если фотографии кажутся вам скучными, возможно, именно поэтому. Эти указания будут работать независимо от того, левша вы или правша.

Ch 5; sl st заканчивается вместе, образуя петлю.

Раунд 1: Ch4; 11 п.н. в петлю, соединить с с / с (всего 12 петель, считая цепную петлю в конце ряда).

Круглый 2: Цепочка 3, 1 постоянный ток в той же петле; 2 постоянного тока в каждую секунду в раунде; соединить без петли (всего 24 петли счетной цепной петли в конце ряда).

3 тур: * ск 1 ст. 7 дк в соседней ул. ск 1 ул. следующую петлю * — сделать петли между * 5 раз.

Стебель: сбн в следующие 2 петли; Цепочка 12, повернуть и сдвинуть каждую петлю назад вверх; Sl на той же строчке, что и цепочка; Сбн в следующей ул.

Раунд 4:

Leaf Point 1: сбн в следующие 4 петли. (3 HDC, 3 в.п., сложить цепочку пополам и снять вместе, 1 HDC в следующей петле) sc в следующих 2 петлях. ул. на следующей ул.

Leaf Point 2: сбн в следующие 4 п. (3 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе петлю, 1 ст. Ст. В следующей ст.) следующие 2 петли сбн, следующую петлю — гладкую.

Лист, точка 3: сбн на следующей ст. постоянного тока в следующие 2 ст. (2 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе, 2 ст. Ст. В следующей ст.) Dc в следующих 2 ст. сбн в следующей ул. ул. на следующей ул.

Leaf Point 4: сбн в следующие 2 ст. (1 ст. Ст., 3 вп, сложить цепочку пополам и снять вместе, 3 ст. Ст. В следующей ст.) Сбн в следующих 4 ст. ул. на следующей ул.

Leaf Point 5: сбн в следующие 2 петли. (1 HDC, 3 в.п., сложить цепочку пополам и снять вместе петлю, 3 HDC в следующей петле) сбн в следующие 4 петли.ул. на следующей ул.

Чтобы сделать «неровности» для точек створок во время прохождения раунда:

Канал 3.

Сложить цепочку пополам…

… затем соедините ch вместе.

Надеюсь, вам понравится этот узор! Пожалуйста, дайте мне знать, что вы думаете, или если у вас есть вопросы!

И не забудьте проверить мои другие бесплатные схемы вязания крючком!


New York Fall Foliage Report

На Long Island , это будут лучшие выходные, чтобы выйти и насладиться осенними красками.В графстве Нассау и западном графстве Саффолк деревья во многих районах сейчас достигли пика окраски. Многие деревья в этом году прямо из зеленого стали коричневыми, поэтому в них много коричневого, смешанного с красными, желтыми, оранжевыми и пурпурными листьями.

Путешественники найдут отличную дорогу по листву вдоль Северного государственного бульвара, где листва достигает пика и, как ожидается, продолжится в течение выходных, с особенно красивыми цветами между съездами с Лейквилл-роуд и Рослин-роуд. Деревья вдоль государственного бульвара Вантаг также сейчас на пике, хотя государственные бульвары Медоубрук и Бетпейдж уже прошли пик.Скоростная автомагистраль Сифорд-Ойстер-Бэй (трасса 135) также в настоящее время показывает пиковые цвета. Еще одна яркая поездка проходит по трассе 25A на северном берегу Лонг-Айленда, особенно по усаженным деревьями участкам от востока Гринвейла до Порт-Джефферсона. Южный государственный бульвар на южном берегу также предлагает некоторые пиковые цвета, хотя многие участки теперь уже прошли через пик.

Спекулянты, сообщающие из Old Westbury , предсказывают пик и прошлый пик листьев в эти выходные, с почти полным изменением цвета и блестящими золотыми, ржавыми, красными, оранжевыми и коричневыми листьями, а также значительным опаданием листьев.Среди государственных парков Sunken Meadow State Park в Kings Park теперь демонстрирует пиковый цвет на площадках для пикников, окружающих парковочное поле 4, и вдоль берегов залива Sunken Meadow Creek. И Bethpage State Park , и Belmont Lake State Park имеют некоторый цвет, но многие районы также пережили пик. Государственный парк Коннеткуот-Ривер в Окдейле также пройдёт пик. Сообщения из Государственного парка Хемпстед-Лейк предсказывают, что листья будут только что пройдя пик с изменением цвета на 90% и ярко-красными, желтыми, оранжевыми и пурпурными листьями.Корректоры, прибывающие из парка штата Valley Stream , предсказывают пик листвы с яркими сезонными оттенками, а также некоторые коричневые листья и опад листвы.

График осеннего старения клеток

Abstract

Мы изучали осеннее старение листьев у свободно растущей осины ( Populus tremula ), отслеживая изменения в пигменте, содержании метаболитов и питательных веществ, фотосинтезе и целостности клеток и органелл. Процесс старения начался 11 сентября 2003 г., по-видимому, инициированный исключительно фотопериодом, и неуклонно прогрессировал без какого-либо очевидного влияния других сигналов окружающей среды.Например, после этой даты стареющие листья накапливали антоцианы в ответ на условия, вызывающие фотоокислительный стресс, но в начале сентября листья этого не делали. Деградация компонентов листа происходила в течение 18 дней, и, хотя не все клетки в каждом листе старели параллельно, старение в дереве в целом было синхронным. Лютеин и β -каротин разлагались параллельно с хлорофиллом, тогда как неоксантин и пигменты ксантофиллового цикла сохранялись дольше.Хлоропласты в каждой клетке быстро превращались в геронтопласты, и многие, хотя и не все, клетки погибли. С 19 сентября, когда уровень хлорофилла упал на 50%, митохондриальное дыхание давало энергию для ремобилизации питательных веществ. Ремобилизация, похоже, прекратилась 29 сентября, вероятно, из-за прекращения транспорта флоэмы, но до опадания последних листьев (более 1 недели спустя) некоторые клетки были метаболически активными и имели хлорофилл-содержащие геронтопласты. Было ремобилизовано около 80% азота и фосфора, и 29 сентября произошло внезапное изменение δ 15 n клеточного содержимого, что указывает на то, что летучие соединения могли быть высвобождены.

Осеннее старение может привлечь больше внимания общественности, но меньше ученых, чем любой другой процесс развития растений. Каждую осень лиственным деревьям нужно сбрасывать листья и готовиться к зиме. Осеннее старение поражает многих деревьев, когда листья меняют цвет с зеленого на желтый и / или красный (Lee et al., 2003). Разные цвета возникают в результате преимущественного разложения хлорофиллов над каротиноидами и синтеза пигментов красного цвета, таких как антоцианы (Goodwin, 1958; Lichtenthaler, 1987).

Осеннее старение, как и другие формы старения листьев, представляет собой тип запрограммированной гибели клеток, то есть клетки листа умирают организованным, заранее определенным образом, контролируемым ядром. С другой стороны, существуют фундаментальные различия между программой старения листьев и апоптотическими процессами, которые были подробно изучены в системах животных, а в последнее время и в растениях (Noodén et al., 1997; Kuriyama and Fukuda, 2002). Фактически, даже предполагалось, что эти процессы взаимно антагонистичны (Ougham et al., 2005), поскольку правильно выполненная программа старения позволяет избежать патологических последствий гибели клеток (Hörtensteiner, 2004). Старение имеет адаптивное значение из-за связанной с ним ремобилизации питательных веществ, особенно азота и, в меньшей степени, фосфора, серы и других элементов (Himelblau and Amasino, 2001; Hörtensteiner and Feller, 2002). Время осеннего старения можно рассматривать как результат компромисса между противоречивыми требованиями по оптимизации азотного и углеродного статуса растения.Деревья, вступающие в раннее старение, будут эффективно ремобилизовать азот за счет фотосинтетического урожая, в то время как деревья, вступающие в поздний период старения, получат больше фотосинтатов, но в некоторые годы их листья погибнут до того, как будет завершена ремобилизация их питательных веществ. Азотный статус влияет на наступление осеннего старения. Например, ольха ( Alnus subsp.), В которой находится азотфиксирующий симбионт (Frankia), сбрасывает листья, пока они еще зеленые, а садоводы в регионах с умеренным климатом знают, что удобрений, богатых азотом, следует избегать, поскольку они задерживают оба осенних старения. и развитие зимостойкости, что ставит под угрозу зимнюю выживаемость (особенно древесных многолетников).

Осеннее старение недостаточно хорошо охарактеризовано на клеточном и молекулярном уровнях, но имеется больше информации о старении листьев у однолетних растений (Buchanan-Wollaston, 1997; Quirino et al., 2000). Хлоропласты, присутствующие в зеленых листьях, дифференцируются в геронтопласты, лишенные многослойных тилакоидных мембран, но богатые электронно-плотными липидными телами, пластоглобулами, которые имеют особенно высокое содержание каротиноидов и эфиров каротиноидов (Tevini and Steinmuller, 1985).Ремобилизация питательных веществ требует разрушения макромолекул и превращения продуктов разложения в переносимые соединения. Многие гены, кодирующие катаболические ферменты (протеазы, липазы, нуклеазы и т. Д.), Входят в число тех, которые индуцируются во время старения (Bhalerao et al., 2003; Buchanan-Wollaston et al., 2003; Andersson et al., 2004; Guo et al. др., 2004). Когда фотосинтетическая способность листьев утрачивается, энергия, необходимая для ремобилизации, должна обеспечиваться митохондриальным дыханием, и, следовательно, ядерные гены, кодирующие компоненты митохондриальной цепи транспорта электронов, не подвергаются подавлению во время осеннего старения, в отличие от генов. кодирование компонентов фотосинтетического аппарата (Buchanan-Wollaston, 1997; Andersson et al., 2004). Хотя листья не осуществляют фотосинтез, транспорт флоэмы из листа необходим для экспорта питательных веществ, поэтому с точки зрения транспорта стареющие листья по-прежнему являются исходными листьями. В конце концов, однако, транспорт флоэмы прекращается, на внутренней стороне черешка образуется защитный слой, проксимально к нему образуется разделительный или отслаивающий слой, и когда стенки клеток в разделительном слое постепенно разрыхляются, лист в конечном итоге опадает ( Робертс и др., 2002). Хорошо известно, что осеннее старение у большинства деревьев вызывается сокращением фотопериода, сигнала, более надежного, чем температура, как предвестника первых сильных заморозков, что позволяет строить календари осеннего старения, которые довольно постоянны в течение многих лет ( е.грамм. www.great-lakes.net/tourism/fallcolor.html; www.arkansas.com/calendar/fall_foliage_pg1.asp). Ключевая роль фитохромов в этом процессе также хорошо задокументирована (Olsen et al., 1997; Chen et al., 2002), но степень, в которой низкие температуры, возможно, в сочетании с интенсивностью света, вызывающей фотоокислительный стресс, модулируют этот процесс, очень велика. не ясно. Общеизвестно, что холодная осень приводит к интенсивной окраске листьев, но физиологические основы этого изменения окраски не совсем понятны.

Мы начали проект по выяснению генетической основы осеннего старения у осины ( Populus tremula ), и в рамках проекта мы идентифицировали многие гены, которые экспрессируются в осенних листьях (Bhalerao et al., 2003) и построили транскрипционный график осеннего старения (Andersson et al., 2004). Однако исследования экспрессии генов сами по себе не всегда предоставляют достаточную информацию для понимания клеточных событий, которые происходят во время процесса старения, тем более что не только анаболизм, но и экспрессия генов прекращается на более поздних стадиях осеннего старения (Andersson et al., 2004). Следовательно, катаболические процессы, ведущие к деградации клеточных компонентов и, в конечном итоге, к гибели клеток, возможно, следует изучать на клеточном биологическом уровне, а не на уровне транскрипции.

Многие фундаментальные вопросы, касающиеся клеточных процессов в осенних листьях осины и деревьев в целом, еще не получили ответа, а в некоторых случаях даже не решены. Например, проявляется ли превращение хлоропластов в геронтопласты в появлении осенней окраски, обусловленной только факторами развития, или же этому способствуют факторы стресса окружающей среды, такие как фотоокисление? Когда и в какой степени восстанавливаются питательные вещества листа? Когда фотосинтез снизился до такой степени, что дыхание митохондрий должно обеспечивать энергию, необходимую для процесса деградации, и после этого момента пластиды все еще играют роль в ремобилизации питательных веществ? Когда и как происходит деградация геронтопластов, ядер и митохондрий и когда клетка в конечном итоге подвергается гибели? Наконец, какие сигналы запускают начало осеннего старения? Чтобы ответить на эти вопросы, мы проследили время наступления осеннего старения у свободно растущей осины и представляем для них клеточное расписание.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Осеннее старение прошло четыре фазы

Как сообщалось для того же дерева осенью 1999 г. (Bhalerao et al., 2003), осеннее старение в 2003 г. в основном прогрессировало синхронно. Осенняя окраска проявлялась раньше на одних листьях, чем на других, и участки каждого листа становились желтыми раньше других, но в этом отношении не было явных различий между разными частями дерева (). Это характерно для осин, но не для всех других пород деревьев.За прошедшие годы мы визуально обследовали тысячи осин, но не обнаружили случаев, когда одна часть дерева прогрессировала бы дальше в осеннем старении, чем другие. Напротив, клены ( Acer subsp.), Например, часто имеют осеннюю окраску в той части кроны, которая больше всего подвержена солнечному свету, в то время как листья все еще остаются зелеными в других частях. У других видов кончики побегов могут быть зелеными, а внутренние части — желтыми. Такие различия, наряду с различиями в цвете листьев, часто позволяют распознавать древесные породы с больших расстояний (Chapman et al., 2000). Эта особенность делает осину удобной модельной системой для изучения осеннего старения, поскольку отбор проб и объединение случайно выбранных листьев, вероятно, даст результаты, которые являются репрезентативными для всего дерева.

A, Осеннее старение у свободнорастущей осины. Изображения были сделаны во время отбора проб листьев (11:30 утра) осенью 2003 года. B, Старение листьев осины (25 сентября). C. Погодные условия в период отбора проб. Серые столбцы представляют количество солнечного света (Вт / м 2 ) в день, а черные столбцы представляют миллиметры осадков в день.Линии соответствуют максимальной и минимальной температуре для каждого дня. сен, сентябрь; окт, октябрь.

Погодные условия в течение экспериментального периода, записанные метеостанцией примерно в 200 м от дерева, отображаются в формате. После нескольких холодных дней с ярким солнцем (с 31 августа по 2 сентября) условия были очень стабильными, с относительно мягкими ясными днями до 19 сентября, когда температура резко упала. Содержание хлорофилла в листьях (), выраженное в пересчете на сухой вес, было более или менее стабильным до 11 сентября.Концентрации хлорофилла a и b начали снижаться 11 сентября (). Отношение хлорофилла a / b было постоянным до 24 сентября, после чего оно уменьшалось примерно на 3 дня, снова стабилизировалось и, наконец, уменьшилось в фазе 4. Незначительные изменения концентрации хлорофилла, наблюдавшиеся до 11 сентября, могли быть связаны с неоднородностью в отобранный листовой материал. На свободно растущем дереве грибковые инфекции и в некоторой степени травоядные насекомые вызывают участки старения на листьях.Это случайные события; обратите внимание, что стандартное отклонение измерений концентрации хлорофилла больше до точки, когда начинается деградация хлорофилла из-за осеннего старения, очевидно, перекрывая эти различия между листьями. Однако возможно, что падение концентрации хлорофилла, наблюдавшееся около 1 сентября, было следствием холодной солнечной погоды в то время, вызвавшей фотоокислительный стресс и некоторое фотообесцвечивание. Если это так, то восстановление уровня хлорофилла в первую неделю сентября указывает на то, что листья еще не были полностью подготовлены к осеннему старению.Независимо от того, правда это или нет, время до 11 сентября, когда уровни хлорофилла были стабильными, явно представляет собой существующую стадию, которую мы обозначили фазой 1. После 11 сентября уровни хлорофилла начали снижаться (фаза 2) с постоянной скоростью до тех пор, пока последние дни сентября, когда концентрация хлорофилла (в пересчете на сухой вес) снизилась примерно до 10% от уровней фазы 1. В фазе 3 дальнейшая деградация хлорофилла была незначительной или не происходила вовсе, но за несколько дней до выпадения, начиная примерно с 6 октября, могло произойти небольшое дальнейшее снижение содержания хлорофилла (фаза 4).

A, Концентрация хлорофилла в осенних листьях осины. Белые и черные кружки представляют общий хлорофилл ( a + b ) за 2003 год и соотношение хлорофилла a / b за 2003 год, соответственно. Каждая точка представляет собой среднее значение трех измерений (± стандартное отклонение). Серая фоновая линия представляет общее количество хлорофилла ( a + b ) за 1999 год (для сравнения тенденций, а не фактических значений). Б, Вес листа (сухой). Пять листьев объединяли, измельчали ​​и взвешивали, а затем рассчитывали массу сухих листьев, исходя из потери массы (%) после сушки небольшого количества материала.

Деградация компонентов листа приводит, конечно, к потере биомассы листа. Чтобы отслеживать изменения биомассы листьев за период, мы рассчитывали сухой вес пяти случайно выбранных листьев каждый день в течение исследуемого периода. Хотя различия в размере пяти листьев приводили к колебаниям данных о сухой массе (), наблюдалась общая тенденция к снижению средней массы листьев с начального значения около 150 мг примерно в то же время, что и хлорофилл. уровни (примерно 11 сентября), достигнув конечного значения около 75 мг.В среднем сухой вес листа упал на 40-50%, показывая, что примерно 50% сухой массы было повторно мобилизовано из листьев. Это привело к тому, что уровни хлорофилла в фазе 3 на лист составляли около 5% от значений фазы 1. Также кажется, что некоторая деградация хлорофилла произошла в фазе 3, поскольку средний сухой вес листа уменьшался медленно, в то время как количество хлорофилла на единицу сухого веса листа было постоянным.

Чтобы сравнить прогрессирование старения в 2003 году с транскрипционным графиком осеннего старения, который мы составили для того же дерева для осени 1999 года, были рассчитаны концентрации хлорофилла в листьях, использованных для получения РНК в 1999 году, которые представлены в .Даты переходов между фазами 1, 2 и 3 за два года были практически идентичны. Наше разделение процесса осеннего старения на четыре фазы обеспечивает основу для следующего исследования клеточного расписания осеннего старения.

Тот факт, что разложение хлорофилла началось в один и тот же день в оба года, указывает на то, что фотопериод был основным триггером перехода во 2-ю фазу, поскольку погодные условия за 10 дней, предшествовавших 11 сентября, были очень стабильными и мягкими в обоих 2003 г. () и 1999 г. (данные не показаны).Однако в оба года дни около 1 сентября были необычно холодными, но солнечными, и эти условия могли спровоцировать переход во вторую фазу после 10-дневной задержки. Чтобы подтвердить или опровергнуть эту гипотезу, мы также исследовали концентрации хорофилла в листьях, взятых в 2001 году, и сопоставили их с погодными условиями (данные не показаны). В этом году дни около 1 сентября не были необычно холодными, но деградация хлорофилла, тем не менее, началась около 11 сентября, что указывает на то, что дерево начало осеннее старение в ответ исключительно на изменения фотопериода.

Динамические изменения метаболизма каротиноидов и антоцианов

Чтобы установить, зависит ли желтый осенний цвет этих листьев от синтеза новых каротиноидов или от их более медленной деградации, мы также измерили их содержание и состав каротиноидов на протяжении всего периода с помощью ВЭЖХ. показаны уровни неоксантина, лютеина, β -каротина и пигментов ксантофиллового цикла. Общая концентрация каротиноидов начала снижаться одновременно с началом разложения хлорофилла, во время перехода от фазы 1 к фазе 2.Однако скорость разложения каротиноидов была медленнее, что привело к изменению цвета листьев с зеленого на желтый. Когда листья стали желтыми, уровень хлорофилла снизился на 75%, а уровень каротиноидов — только примерно на 50%. В фазе 3 уровни каротиноидов были достаточно стабильными, но в фазе 4 они снова начали снижаться. Между разными каротиноидами наблюдались значительные различия в скорости разложения. β -Каротин разлагался в основном параллельно с хлорофиллом; скорость разложения лютеина также следовала четырехфазной схеме, хотя уровни не уменьшались так сильно, как для хлорофилла.Уровни неоксантина примерно соответствовали уровням хлорофилла на протяжении фазы 2, но также продолжали снижаться в фазах 3 и 4. Общая концентрация пигментов ксантофиллового цикла (виолаксантин, антераксантин и зеаксантин) была более стабильной и снизилась только примерно на 50% на сухом от веса (75% на лист) за исследуемый период.

Концентрация каротиноидов в осенних листьях осины. A, общее содержание каротиноидов. Символы обозначают неоксантин (кружки), ксантофиллы (треугольники), лютеин (ромбы) и β -каротин (квадраты).Каждая точка представляет собой среднее значение двух измерений (± стандартное отклонение). B, состояние эпоксидирования пигментов ксантофиллового цикла. C. Накопление продуктов распада каротиноидов. Линии соответствуют разным пикам в.

Пигменты ксантофиллового цикла могут взаимно превращаться в ксантофилловом цикле, а в зеленых листьях динамика пулов ксантофиллов определяется факторами окружающей среды. Виолаксантин превращается в зеаксантин через антераксантин в реакции, катализируемой ферментом виолаксантин де-эпоксидаза, когда pH просвета уменьшается в результате световых реакций, создавая более высокий градиент протонов, чем может быть использован при фиксации CO 2 (Demmig-Adams , 1990).Такие погодно-зависимые изменения в пулах ксантофилла четко наблюдались до конца фазы 2 (). Однако даже на протяжении фазы 3 такие изменения происходили, хотя амплитуда была значительно уменьшена, а наблюдаемые изменения, возможно, не были значительными.

С середины фазы 2 на хроматограммах начали появляться новые пики (Suzuki and Shioi, 2004). Мы смогли выделить девять пигментов в дополнение к нормальным фотосинтетическим пигментам, которые накапливались во время осеннего старения ().Эти каротиноиды / производные каротиноидов были предварительно идентифицированы путем регистрации их спектров поглощения и воздействия на экстракты высоких значений pH (омыление), обработка, которая разрывает сложноэфирную связь сложных эфиров каротиноидов и высвобождает каротиноидные фрагменты (Granado et al., 2001). Насколько нам известно, эти пигменты не были тщательно охарактеризованы ранее, и мы не пытались сделать это здесь строго; таким образом, присвоения носят предварительный характер (подробности предварительной идентификации см. в разделе «Материалы и методы»).Хотя некоторые из этих пигментов (CX, NE2, NE3 и VE1) уже присутствовали в небольших количествах в фазе 1, накопление началось во второй фазе (12, 15 и 21 сентября для VX, NE4 и VE2 соответственно). Схема для CY и NE1 не была ясна, но накопление, похоже, началось примерно 20 сентября. Формирование первых, пока еще не охарактеризованных катаболитов каротиноидов, по-видимому, совпало с началом распада хлорофилла, но некоторые из них не проявились до более поздних стадий. старения, когда уровень хлорофилла снизился на 50% и более.Во время фазы 4 эти катаболиты каротиноидов уменьшались параллельно с уменьшением других каротиноидов.

Таблица I.

Фотосинтетические пигменты и пигментные катаболиты в осенних листьях осины, разделенные методом ВЭЖХ

Некоторые определения пиков являются предварительными (подробности см. В разделе «Материалы и методы»).

51 8 9048 904 NE1)
Пик Время удерживания Соединения
мин
1 1.97 транс-неоксантин
2 2,14 9-цис-неоксантин
3 2,59 Виолаксантин
Виолаксантин
5,15 Лютеин
6 5,44 Зеаксантин
7 6,19 Каротиноид X (CX)
6 Каротиноид Y (CY)
9 7,71 Хлорофилл b
10 8,00 Хлорофилл 8,00 Хлорофилл
12 8,30 Сложный эфир неоксантина 2 (NE2)
13 8,50 Сложный эфир виолаксантина 1 (VE1)
1486 Сложный эфир неоксантина 3 (NE3)
15 9,40 Сложный эфир неоксантина 4 (NE4)
16 9,64 Сложный эфир Виолаксантина 9048 Виолаксантин X (VX)
18 10,73 β -Каротин

Хотя эти пигменты сильно накапливались во время осеннего старения, ни один из них, похоже, не стал доминирующим пигментом в листьях.Мы не знаем их точных коэффициентов экстинкции, поэтому их невозможно точно определить количественно, но поскольку омыление, по-видимому, количественно превращает их в неоксантин, виолаксантин и антераксантин, увеличение концентраций этих пигментов после омыления, вероятно, отражает количество пигментов. соответствующие эфиры каротиноидов. 3 октября неоксантин, виолаксантин и антераксантин вместе составляли около 25% от общего пула каротиноидов (включая лютеин, зеаксантин и β -каротин), и поскольку количество этих пигментов увеличилось примерно на 50% после омыления, по нашим оценкам, общее количество этерифицированных каротиноидов составляет от 10% до 15% от общего пула каротиноидов.

Каротиноиды — не единственные пигменты, отвечающие за осенние цвета; антоцианы часто накапливаются (Lee et al., 2003), вызывая темно-красноватый цвет листьев, и было предложено действовать как светозащитные средства при рециркуляции питательных веществ стареющими листьями (Feild et al., 2001; Hoch et al. 2003 г.). Поэтому мы количественно оценили уровни антоцианов, чтобы увидеть, изменились ли они во время осеннего старения в листьях осины. Спектроскопические измерения общей концентрации антоцианов в экстрактах листьев показали, что они действительно увеличивались во время осеннего старения ().Уровни были низкими и постоянными примерно до 5 дней фазы 2 (15 сентября), после чего уровни хлорофилла снизились примерно на 25%. Начало накопления антоцианов, очевидно, не было связано с фотоокислительным стрессом, поскольку 12 дней, предшествовавших 15 сентября, были солнечными, но очень мягкими. Однако, как только началось накопление антоцианов, дальнейшее накопление, по-видимому, сильно зависело от условий избыточного освещения, то есть от холодной и солнечной погоды. Ясные, холодные дни 19 и 20 сентября вызвали огромное накопление антоцианов, более половины из которых исчезли в последовавшую затем более мягкую и дождливую неделю, в то время как мороз и солнце 30 сентября привели к новому накоплению с последующей деградацией. в мягкие и дождливые дни в начале октября.Наконец, с 4 октября погода была ясной и холодной, что привело к очень высокому накоплению антоцианов.

Концентрация антоцианов в осенних листьях осины. Каждая точка представляет собой среднее значение двух измерений (± стандартное отклонение).

Листья теряют активность фотосинтеза и потребности в энергии затем удовлетворяются митохондриями.

Когда хлорофилл начинает разлагаться и хлорофилл-связывающие белки ремобилизуются, фотосистемы страдают и фотосинтез снижается.Хотя уровни хлорофилла отражают общее количество хлорофилл-связывающих белков, они не дают прямого указания на то, функционирует ли фотосинтетический аппарат, поэтому мы хотели напрямую оценить фотосинтетическую активность осенних листьев. Провести точные измерения газообмена на прикрепленных ветвях непосредственно в поле было невозможно, и отдельные ветки довольно быстро потеряли свою фотосинтетическую способность, предположительно из-за закрытия устьиц. Наиболее удобный способ — измерить флуоресценцию хлорофилла, которая представляет собой чувствительный инструмент для изучения фотосинтетически активных центров ФСII in vivo.В здоровых листьях без стресса соотношение F к / F m составляет от 0,80 до 0,85, тогда как в листьях с стрессом это соотношение может уменьшиться до 0,70 или меньше (Öquist and Wass, 1988). Однако при интерпретации данных о соотношении F v / F m следует помнить, что они являются относительными показателями, которые отражают статус имеющихся центров PSII и не обеспечивают точных количественных оценок количества центров. .

Мы проследили за четырьмя листьями осенью и измерили F v / F m два раза в неделю ().Один лист оказался значительно нагруженным в начале серии измерений и показал значения F v / F m ниже 0,6. Однако этот лист восстановился, и его значения стали аналогичными показателям других листьев, показывая, что, по крайней мере, до первой недели сентября способность к восстановлению PSII была достаточной для восстановления поврежденных центров PSII. Несколько удивительно, что отношения F v / F m оставались высокими и более или менее постоянными до 26 сентября, когда концентрации хлорофилла снизились примерно на 80%, т.е.е. на протяжении почти всей фазы 2. По-видимому, поэтому оставшиеся центры ФСII были фотосинтетически активными даже на очень поздних этапах программы старения. Поскольку широкий спектр стрессов, которые влияют либо на хлоропласт, либо на остальную часть клетки, могут влиять на F v / F m , это открытие показывает, что деградация фотосинтетического аппарата строго регулировалась. В самом конце фазы 2 и позже в фазе 3, F v / F m уменьшилось во всех листьях, но измеримое F v / F m соотношение присутствовало в одном из листьев даже 3 октября, что свидетельствует об активных центрах ФСII.

Фотохимическая эффективность ФСII ( F v / F m ) в осенних листьях осины. Осенью последовали четыре листа.

Когда фотосинтетическая способность снижается, митохондрии, по-видимому, должны выступать в качестве основных источников энергии при разложении хлоропластов и других компонентов клетки. Чтобы проверить это предположение, мы измерили уровни АТФ и АДФ в листьях, которые были мгновенно заморожены в жидком азоте на свету ().

Изменение энергетического статуса и снижение содержания сахара в осенних листьях осины.Каждая точка представляет собой среднее значение трех измерений. A, содержание аденилата (АТФ + АДФ) и соотношение АТФ / АДФ. B. Концентрации растворимых сахаров и крахмала.

Содержание аденилата (АТФ + АДФ) было постоянным в течение фазы 1, а соотношение АТФ / АДФ было первоначально относительно низким (около 2), но постепенно увеличивалось почти до 4. Во время фазы 2 содержание аденилатов снижалось примерно одинаково. путь к хлорофиллу, и во время первой части фазы 2 соотношение АТФ / АДФ быстро увеличивалось с 4 до примерно 8.Снижение содержания аденилата может отражать деградацию хлоропластов, которые содержат большую часть клеточного пула аденилата (Gardeström and Wigge, 1988). Кроме того, компартмент хлоропласта обычно имеет более низкое соотношение АТФ / АДФ, чем остальная часть клетки (Gardeström and Wigge, 1988; Bykova et al., 2005). Таким образом, наблюдаемое увеличение отношения АТФ / АДФ согласуется с деградацией пула хлоропластов.

В совокупности эти данные показывают, что хлоропласты являются основными источниками энергии для листьев в фазе 1.В фазе 2 деградация фотосинтетического аппарата создает постепенный сдвиг в сторону возрастающей зависимости от митохондриального дыхания, а с середины фазы 2 (19 сентября) и на протяжении фазы 3 митохондрии, по-видимому, обеспечивают большую часть энергии осенних листьев. В фазе 4 падение отношения АТФ / АДФ и общего пула аденилата также указывает на то, что оставшиеся митохондрии разрушаются.

Чтобы лучше понять этот переход от органа, зависящего от фотосинтеза, к органу, зависящему от дыхания, мы также хотели определить время, в которое клетки перестали накапливать сахар и крахмал.Сахара (Suc, Glc и Fru) и крахмал измеряли в комбинированном анализе из пула листьев, который также использовали для анализа аденилата. Во время фазы 1 основными компонентами были Suc и крахмал, и были обнаружены очень низкие количества Glc и Fru. Во второй фазе уровни Glc и Fru первоначально увеличивались, в то время как Suc и крахмал оставались в изобилии. Следовательно, наибольшее содержание общих углеводов наблюдалось 15 сентября, когда хлорофилл уже начал уменьшаться. После этого Suc и крахмал быстро уменьшались, так что после 22 сентября Glc и Fru были доминирующими сахарами, оставаясь на высоких уровнях на протяжении фазы 2, прежде чем уменьшаться во время фаз 3 и 4.

Азот и фосфор ремобилизуются в осенних листьях осины

Для получения данных о чистых потоках питательных веществ из осенних листьев мы подвергли листья элементарному анализу, измеряя δ 13 C и δ 15 n и уровни углерода, азота, калия, серы, фосфора и железа в листьях во время процесса старения. Отношение 13 C / 12 C существенно не изменилось (данные не показаны), но, как показано на, относительное содержание углерода и азота и значение δ 15 n существенно изменились в течение осени.В пересчете на сухой вес содержание углерода было постоянным, что неудивительно, поскольку на углеводы приходится подавляющая часть биомассы листьев. Поскольку средний вес листа уменьшился примерно на 50% за период времени, кажется, что примерно 50% углерода листа было потеряно.

Элементный состав осенних листьев осины. A, Изменения относительного содержания (%) углерода и азота и значений δ 15 n (). B. Изменения относительного содержания (%) калия, серы, фосфора и железа.Каждая точка представляет собой среднее значение трех измерений (± sd × 2).

С другой стороны, содержание азота, возможно, немного снизилось даже в фазе 1 и очень заметно во время фазы 2. В фазах 3 и 4 азот, по-видимому, ремобилизовался медленно или не восстанавливался вовсе, поскольку содержание азота в сухом весе база изменилась лишь незначительно. В целом около 80% общего азота листьев (60% в пересчете на сухой вес) было выведено во время осеннего старения. Осенью содержание фосфора также снизилось примерно на 80% в расчете на лист (60% в пересчете на сухой вес), хотя содержание фосфора начало снижаться в фазе 1 еще до 11 сентября () и стабилизировалось в фазах 3 и 4.Ремобилизацию 80% фосфора можно сравнить с разложением аденилатов, которое составляло 90% в пересчете на лист. Неудивительно, что фосфаты, связанные с другими комплексами, менее легко ремобилизуются, чем фосфаты из пула аденилата. Ремобилизация серы была менее эффективной, но все же значительной: содержание серы уменьшалось параллельно с уменьшением сухой массы листа; и уровень в пересчете на сухой вес снизился примерно на 10%, показывая, что примерно 50% общей серы в листьях было ремобилизовано.Калий также был ремобилизован, в основном в течение короткого промежутка времени непосредственно перед входом в фазу 2. В фазах 2 и 3 уровни калия существенно не изменились в пересчете на сухой вес. В пересчете на сухой вес уровень железа увеличился примерно на 60%. Это соответствует только 20% ремобилизации листового железа. В целом ремобилизация питательных веществ для листьев, в частности азота, была эффективной.

Неожиданно мы заметили быстрое изменение значений δ 15 N клеточного содержания, которое медленно снижалось на протяжении фазы I, показывая, что макромолекулы с высокими значениями δ 15 N имели немного более высокую скорость катаболизма, чем средние азотистые молекулы.Вероятно, это произошло из-за того, что разные фракции белков листа имели немного разные значения N δ 15 из-за различий в их биосинтетической истории, и разложение разных фракций не было одинаково эффективным. Однако между 28 и 30 сентября (переход к фазе 3) произошло очень резкое изменение в δ 15 N, и они медленно снижались, но оставались высокими на протяжении фаз 3 и 4.

Хлоропласты разлагаются и растворяются, Но некоторые пластиды остаются неповрежденными и сохраняют свой хлорофилл

Чтобы проследить ультраструктурный процесс осеннего старения в клетках, мы изучили клетки и органеллы листа с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ;).Для иллюстрации клеточных изменений во время старения были выбраны репрезентативные электронные микрофотографии пяти дат, отображающие ультраструктуру как целых клеток (слева), так и хлоропластов (справа). В конце фазы 1 (8 сентября) клетки мезофилла имели нормальную форму, были выстланы хлоропластами и митохондриями, и как цитоплазма, так и вакуоль были интактными (). Хлоропласты имели определенную форму и структуру () с большим количеством гранул крахмала и видимыми стопками гран. Однако даже на этой стадии хлоропласты содержали много пластоглобул.В середине фазы 2 (18 сентября) концентрация хлорофилла снизилась на 50%. Многие клетки () и хлоропласты () выглядели почти без изменений, но количество электронно-плотного материала в клетках в среднем уменьшилось. Тонопласт был менее выражен, и можно было увидеть неизвестные структуры (мелкие пузырьки). В некоторых клетках хлоропласты утратили структуру внутренней мембраны, тогда как в других клетках они оказались активными по отношению к зернам крахмала. Наблюдались четкие различия между различными частями листа, что неудивительно, поскольку на этом этапе пятнистость также была очевидна на макроскопическом уровне, многие листья имели желто-зеленый мозаичный узор ().

Изменение ультраструктуры клеток мезофилла осенью. Структурные изменения клеток (A, C, E, G, I) и хлоропластов (B, D, F, H, J) в пяти временных точках осеннего старения (см.). Полосы размера соответствуют 10 мкм м (G и I), 5 мкм м (A и E), 2 мкм м (C), 1 мкм м (D, F, H и J) , 0,5 мкм м (В). сен, сентябрь; окт, октябрь.

В конце фазы 2 (25 сентября, когда осталось 25% исходного хлорофилла) многие клетки потеряли большую часть своего электронно-плотного материала ().Стало частым разрушение хлоропластов (), проявляющееся в потере гранул крахмала, увеличении количества и размера пластоглобул и потере нормальной структуры тилакоидной мембраны (замененной набуханием ламелл). Присутствовало много мелких пузырьковидных структур (), по-видимому, расположенных не в цитоплазме, а в вакуолярном пространстве, которое постепенно становилось менее структурированным, но более электронно-плотным, чем в фазе 1. Клетки на этой стадии, по-видимому, содержали меньшее количество хлоропластов и митохондрии и цитоплазма были ограничены небольшими участками вдоль стенок.Некоторые клетки казались почти пустыми, иногда располагались рядом с клетками, содержащими хлоропласты. Казалось, что клетки не содержат пластиды на разных стадиях развития, то есть как хлоропласты, так и геронтопласты, но каждая клетка, казалось, была полностью синхронизирована с точки зрения развития пластид.

В поздней фазе 3, 3 октября (когда оставалось менее 5% исходного хлорофилла), клетки на электронных микрофотографиях выглядели еще менее структурированными, и любая оставшаяся цитоплазма и пластиды собирались в углах некоторых клеток, тогда как другие оказались пустыми ().Обнаруженные пластиды представляли собой набухшие геронтопласты, состоящие в основном из крупных пластоглобул, но некоторые митохондрии и несколько ядер все еще выглядели нетронутыми (). Некоторые пластоглобулы также начали выдавливаться каплями из геронтопластов, что, возможно, соответствовало массовому исходу, о котором сообщалось из геронтопластов сои (Guiamet et al., 1999), а цитоплазматические области были гетерогенными и содержали структуры, подобные пузырькам. В фазе 4, наконец, большинство клеток оказались пустыми и мертвыми (), хотя некоторые все еще содержали геронтопласты, заполненные пластоглобулами, и были обнаружены некоторые митохондриально-подобные структуры ().

Нас заинтриговали открытия, что содержание хлорофилла в листьях фазы 3 составляло около 5% от содержания хлорофилла в листьях фазы 1 (хотя они казались желтыми), и что некоторые листья давали определяемый F v / F м передаточное число . Чтобы получить лучший обзор компартментализации хлорофилла в листьях поздней фазы 3, мы просканировали листья, отобранные 6 октября, с помощью конфокальной микроскопии и зарегистрировали автофлуоресценцию хлорофилла.

показывает разрезанный лист при двух разных увеличениях.Оставшийся хлорофилл был обнаружен в пластидах или, по крайней мере, в структурах, подобных органеллам, по всему мезофиллу (как в палисадных клетках, так и в губчатом мезофилле), но чаще вблизи жилок. Некоторые клетки явно лишены пластид, но некоторые содержат одну или несколько хлорофилл-содержащих пластид, иногда расположенных в противоположных углах клетки. Эта и ПЭМ-микрофотографии показывают, что даже на этой очень поздней стадии старения некоторые клетки содержат хлорофилл-содержащие пластиды, возможно, выполняющие метаболическую функцию.

Автофлуоресценция хлорофилла (красный цвет), измеренная с помощью конфокальной микроскопии на листе фазы 4 (6 октября). A, ткань мезофилла. B, сегмент листа. Полосы размеров соответствуют 50 мкм м (вверху) и 100 мкм м (внизу). ep, эпидермис; приятель, частокол; mes, мезофилл.

ОБСУЖДЕНИЕ

Изучаемое нами дерево имеет несколько миллионов листьев. Каждый лист содержит около 30 миллионов клеток, а каждая клетка в среднем около 40 хлоропластов. Великолепное проявление осеннего старения является результатом синхронизированного и явно строго контролируемого преобразования этих ≈10 15 хлоропластов в геронтопласты и последующей деградации большинства клеточных органелл, включая геронтопласты.Мы следили за этим процессом, измеряя пигменты, ключевые метаболиты, такие как АТФ и Suc, макроэлементы, фотосинтез, а также целостность клеток и органелл на протяжении всего процесса. Сгенерированные данные могут быть скомпилированы для создания клеточного расписания осеннего старения (), в котором процесс старения разделен на четыре временные фазы, чтобы выделить ключевые события, первое подробное описание клеточных событий, которые происходят во время осеннего старения. Это, конечно, не абсолютный и общий график, поскольку разные виды деревьев следуют разным образцам, и даже в пределах одного вида наблюдаются значительные различия, например, в начале процесса.Такие факторы, как статус питательных веществ, также влияют на начало процесса. Тем не менее, мы полагаем, что исследования одного дерева за один год имеют общее значение и информативны в отношении порядка происходящих событий. Надежные данные о последовательности событий необходимы для механистического понимания процесса и для проведения подробных исследований, позволяющих учитывать различия между видами и индивидуумами.

Клеточное расписание осеннего старения Populus tremula , составленное на основе данных, представленных в этой статье.«Потеря цитоплазмы» обозначает комбинацию двух событий, деградации цитоплазмы и взрыва вакуоля. МЭС, Основной источник энергии.

Создавая клеточный график осеннего старения для осины, мы полагаем, что получили новое понимание некоторых из основных нерешенных вопросов, касающихся осеннего старения. Мы показали, что переход в фазу 2 был вызван фотопериодом, и что температура (и свет) практически не влияли на начало старения. Процесс осеннего старения, когда-то инициированный факторами окружающей среды, по-видимому, представляет собой жестко контролируемую программу развития, которая существенно не изменяется под воздействием факторов окружающей среды.Хлорофилл разлагался с довольно постоянной скоростью, хотя погодные условия менялись (и различались в разные годы). Если бы фотоокисление пигментов было основным определяющим фактором, скорость разложения увеличилась бы, например, в холодные ясные дни (например, 19 и 20 сентября), чего не было (Kukavica and Jovanovic, 2004). Хлорофилл разлагался с постоянной скоростью, и катаболиты каротиноидов начали появляться после 12 сентября, до того, как наблюдалось образование геронтопластов. С другой стороны, фотоокислительный стресс, по-видимому, был основным определяющим фактором накопления антоцианов, и уровни антоцианов динамически менялись в зависимости от погоды.Стимулирование осенних красок холодной погодой, по-видимому, было вызвано исключительно воздействием на накопление антоцианов. Накопление антоцианов, по-видимому, лучше коррелировало с избытком света (сильный свет и холод), чем с одним только ярким светом или холодом, что согласуется с гипотезой о том, что антоцианы играют фотозащитную роль. Большие колебания содержания антоцианов показали, что антоцианы быстро метаболизируются вплоть до опадания листьев. Катаболизм антоцианов может регулироваться светом или, альтернативно, регулируемый анаболизм в листьях осины может конкурировать с, казалось бы, нерегулируемым катаболизмом, подобно регуляции цикла ксантофилла.Интересно, что листья в фазе 1, по-видимому, не были настолько компетентны, чтобы реагировать на раздражители, которые позже привели к накоплению антоцианов. 1 и 2 сентября были такими же холодными, как 19 сентября, и свет был ярче, но накопления антоцианов в это время не наблюдалось. Эти наблюдения, вместе с тем фактом, что поврежденные центры ФСII также были восстановлены в течение первой недели сентября, демонстрируют, что листья в этот момент еще не были готовы к процессу старения. Это согласуется с нашим предыдущим предположением о том, что пик транскрипционной активности в первую неделю сентября совпадает с переключением в процессе развития, перепрограммирующим лист к старению (Andersson et al., 2004).

11 сентября начался процесс деградации (2 этап). Эта дата вступления в фазу 2 была одинаковой в течение нескольких лет, с разными погодными условиями, и поэтому, вероятно, будет контролироваться фотопериодом. Сигнал старения вызвал у клеток деградацию их фотосистем (и хлорофилла), высвобождая таким образом каротиноиды, некоторые из которых (лютеин и β -каротин) разлагались, тогда как другие (особенно неоксантин и виолаксантин) этерифицировались и накапливались в пластоглобулах.Этот процесс казался очень быстрым внутри каждой пластиды, поскольку отношения F v / F m оставались высокими и постоянными до самого конца процесса. Если бы большая часть центров ФСII, присутствующих в хлоропластах, подвергалась процессам деградации, это, вероятно, проявилось бы в снижении общих значений F v / F m . По-видимому, поэтому, хотя общая фотосинтетическая способность снижается вместе с деградацией хлорофилла, фотосинтетические параметры оставшихся центров ФСII остаются постоянными до самого конца процесса.Мы интерпретируем эти данные как указание на то, что переход от полностью фотосинтетически активного хлоропласта к геронтопласту происходит очень быстро, и эти данные согласуются с моделью, в которой все хлоропласты в данной клетке претерпевают переход одновременно, в то время как соседняя клетка может находиться на другой стадии развития. Изменения соотношения хлорофилла a / b показали, что деградация антенных хлорофиллов в конце фазы 2 происходит медленнее, чем деградация хлорофилла a в реакционных центрах.Это в некоторой степени напоминает ситуацию с некоторыми мутантами, остающимися зелеными, где оставшийся хлорофилл в стареющих в остальном листьях связан со светособирающим комплексом II (Hilditch et al., 1986). Адаптивное преимущество сохранения антенны и демонтажа реакционных центров неясно, но было продемонстрировано во время старения листьев у других видов (Wolf, 1956; Lichtenthaler, 1987). Параллельно с дегенерацией хлоропластов экспрессия фотосинтетических генов сильно подавлялась (Andersson et al., 2004). После вступления в фазу 2 цитоплазма начала разрушаться, что в конечном итоге затрудняло различение цитоплазмы от вакуоли. Мы смогли обнаружить небольшие пузырьки, возможно, похожие на пузырьки, описанные Otegui et al. (2005), ядра постепенно исчезли, и клетки, похоже, в этот момент в значительной степени перестали синтезировать белок; по крайней мере, нам не удалось извлечь высококачественную РНК из листьев после 24 сентября (Andersson et al., 2004).

Во время процесса старения листьев большая часть азота и фосфора извлекалась.Относительное содержание углерода не изменилось (), но, поскольку сухой вес листа уменьшился (), некоторое количество углерода также может сохраняться. Эта массивная ремобилизация требует, конечно, участия многих катаболических ферментов, а гены, кодирующие различные типы протеаз, липаз и ферментов, участвующих в метаболизме нуклеотидов, гликонеогенезе и ремобилизации азота (среди прочего), либо индуцируются, либо продолжают экспрессироваться. , в осенних листьях (Bhalerao et al., 2003; Andersson et al., 2004; Terce-Laforgue et al., 2004).

Старение — это энергоемкий процесс, в котором АТФ необходим для разложения, рециркуляции и транспортировки питательных веществ из клетки. Поскольку фотосинтез снижается во второй фазе, митохондриальное дыхание должно взять верх, чтобы обеспечить клетку энергией, необходимой для этих процессов. Таким образом, значительная часть углерода, потерянного листом, скорее всего, произойдет из-за дыхания и не будет извлечена. Мы не измеряли дыхание во время процесса, но ясно, что митохондрии остаются активными в течение всего старения, поскольку интактные митохондрии можно было увидеть на изображениях электронной микроскопии в конце процесса.Гены, кодирующие компоненты митохондриального транспорта электронов, также продолжают экспрессироваться на протяжении всего периода (Andersson et al., 2004). Наблюдая за изменениями уровней ключевых метаболитов (отношения АТФ / АДФ и размер пула, крахмал и различные растворимые сахара), мы обнаружили доказательства, указывающие на то, что смещение основных источников энергии клетки от хлоропластов к митохондриям, вероятно, произошло примерно 19 сентября.

30 сентября процесс деградации был в основном завершен, и листья вступили в фазу 3.Вероятно, этот переход совпадает с образованием на черешке защитных и разделительных слоев, которые блокируют дальнейший транспорт флоэмы из листа. Изменения после этой даты были незначительными, и, поскольку листья начали опадать, а отдельные листья, в которых процесс был несколько замедлен, с большей вероятностью были задержаны, это может объяснить слабость некоторых тенденций в данных и предполагает, что наше разделение между фазами 3 и 4 фаза могут быть искусственными. Некоторые клетки на этой стадии казались пустыми (и, вероятно, мертвыми), тогда как многие из них содержали ядра, митохондрии и небольшое количество геронтопластов.Вакуоли и цитоплазма не отличались друг от друга. Динамические изменения переменных, таких как уровни пигментов ксантофиллового цикла и антоцианов, а также присутствие нескольких активных фотосистем во время фазы 3 предполагают, что значительная часть клеток все еще была жива и метаболически активна. Многие из этих клеток содержали хлорофилл-содержащие пластиды, и уровень остаточного хлорофилла составлял примерно 5% от уровней фазы 1, но только небольшая часть этого оставшегося хлорофилла, по-видимому, была фотосинтетически активной, и эта активность была потеряна во время фазы 3.Остаточный хлорофилл, вероятно, локализуется в пластоглобулах, где большое количество каротиноидов может служить эффективным гасителем избыточной энергии возбуждения.

Внезапный сдвиг в соотношении изотопов азота в самом конце фазы 2 (29 сентября) был неожиданным открытием. Ранее сообщалось об изменениях в соотношении изотопов азота в стареющей хвое сосны, и для их объяснения были выдвинуты три гипотезы (Näsholm, 1994). Поскольку две из гипотез (дискриминация δ 15 N в процессе транслокации азота и возможность того, что пулы азота, которые не деградируют, как белки клеточной стенки, имеют относительно высокие значения δ 15 N), несовместимо с таким резким сдвигом соотношения; Третья гипотеза, эмиссия азотсодержащих летучих соединений (с низким значением δ 15 N), может быть лучшим объяснением наших результатов.Сообщалось о выделении летучих из стареющих листьев (Husted et al., 1996), и наш вывод о том, что внезапное изменение соотношения изотопов совпало с переходом от фазы 2 к фазе 3 и, вероятно, с прекращением транспорта флоэмы из листьев, совместим с гипотезой о том, что азотсодержащие соединения могут накапливаться в листьях до токсичных уровней, поскольку катаболизм белков, вероятно, продолжается, поэтому может высвобождаться аммиак для уменьшения количества избыточного азота. Возможно, это резкое изменение δ 15 N является признаком окончания процесса ремобилизации осенних листьев.

Есть два возможных объяснения удержания некоторых клеток и органелл на протяжении фазы 3. Мы полагаем, что к концу фазы 2 дерево прошло через важные этапы процесса старения, что позволило восстановить питательные вещества, и что образовался разделительный слой, поэтому дальнейшая ремобилизация невозможна. Однако, если есть листья, которые все еще могут экспортировать некоторый материал, для ремобилизации потребуются катаболические действия. Накопление пластид, вероятно, индикатор живых клеток, ближе к венам совместимо с гипотезой о том, что во время фазы 3 (и 4) клетки, расположенные далеко от вен, могут погибнуть, но клетки, расположенные ближе к венам, могут погибнуть. участвуют в деградации макромолекул.Дерево может быть подготовлено к зиме к концу фазы 2, но если не возникнет достаточно сильный мороз, чтобы убить клетки, дерево получит бонусную фазу, в которой небольшая часть оставшихся питательных веществ, возможно, может быть повторно мобилизована. Второе возможное объяснение состоит в том, что если клетки листа функционально отделены от ствола, их судьба не повлияет на остальную часть дерева, поэтому они могут жить или умереть без каких-либо особых адаптивных преимуществ. В любом случае эти данные совместимы с представлением о том, что старение листа и гибель клеток являются в некоторой степени антагонистическими процессами.

Наши данные показывают, что накопление антоцианов, вероятно, играет роль в фотозащите, как предполагают несколько авторов (Feild et al., 2001; Hoch et al., 2003). В экологической литературе недавно появились предположения о возможной связи между осенним старением и травоядностью насекомых (Archetti, 2000; Hagen et al., 2003), предполагая, что осенние цвета могут быть честным или нечестным сигналом насекомым о том, что статус дерева. Сильные аргументы против этого с физиологической точки зрения были выдвинуты Ougham et al.(2005), и, учитывая тот факт, что накопление и деградация пигментов в осенних листьях можно объяснить очевидными физиологическими факторами и факторами развития, мы думаем, что прямая связь между осенними цветами и предпочтениями травоядных животных маловероятна, и вместо этого наблюдаются явления. сильно коррелированны, потому что оба сильно зависят от азотного статуса дерева.

Есть ли точка невозврата в осеннем старении листьев осины? Насколько нам известно, этот вопрос экспериментально не рассматривался, но, учитывая события, за которыми мы здесь наблюдали, можно предположить, что перепрограммирование экспрессии генов в конце фазы 1 может быть необратимым процессом или, альтернативно, что листья могут повторно зеленый, если все дерево подвергается более длительному световому периоду.Однако сомнительно, чтобы такая способность имела адаптивное значение в природе, поскольку деревья никогда не испытают увеличения фотопериода осенью. Однако теперь у нас есть инструменты для решения этого вопроса.

Детально изучив дерево во время осеннего старения, мы считаем, что получили новое понимание фундаментальных вопросов, поставленных во введении. Превращение хлоропластов в геронтопласты обусловлено факторами развития, питательные вещества в значительной степени ремобилизуются в течение 18 дней (с 11 по 29 сентября, фаза 2), а в середине этой фазы митохондрии берут на себя роль основных поставщиков. энергии для процесса.Во время этой фазы пластиды превращаются в геронтопласты, и многие клетки умирают, но некоторые выживают и сохраняют свои геронтопласты, митохондрии и, возможно, ядра до тех пор, пока листья не опадают, вплоть до 1 недели спустя.

Наконец, фотопериод, по-видимому, является единственным триггером начала осеннего старения у осины, а цепь передачи сигнала между фоторецепторным фитохромом и нижестоящими генами, которые выполняют программу старения, теперь можно исследовать с помощью молекулярных и геномных инструментов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Листовой материал

Образцы листьев отбирали каждый день с 11 до 11:30 с 25 августа по 9 октября 2003 г. со свободнорастущей осины ( Populus tremula ) в кампусе Университета Умео. (см. Bhalerao et al., 2003). В каждый момент времени собирали по пять листьев, объединяли и измельчали ​​в жидком азоте. Один или два раза в неделю собирали два отдельных листа для фиксации, заделки и ТЕА. Измеряли свежий и сухой вес и рассчитывали средний вес листьев.

Спектроскопические измерения

Хлорофилл

Тройные копии примерно 30 мг материала измельченных листьев (смесь пяти листьев для каждого срока) экстрагировали в 80% водном растворе ацетона, забуференном 25 мм HEPES. Экстракт анализировали на оптическую плотность при длинах волн 646,6, 663,6 и 750,0 нм с использованием спектрофотометра Biochrom 4060 (Pharmacia LKB Biochrom). Затем рассчитывали концентрации хлорофилла a и хлорофилла b с использованием уравнений Porra et al.(1989).

Антоцианы

Дубликаты примерно 40 мг материала измельченных листьев (смесь пяти листьев для каждого финика) экстрагировали 85% водным ацетоном и 1% HCl (85:15) при 4 ° C. После разделения фаз диэтиловым эфиром для удаления хлорофиллов водный экстракт анализировали на оптическую плотность при длинах волн 535,0, 650,0 и 750,0 нм с использованием спектрофотометра Biochrom 4060 (Pharmacia LKB Biochrom). Затем были рассчитаны концентрации антоцианов с использованием коэффициента экстинкции (при λ = 535 нм) согласно До и Кормье (1991).

Анализ пигментов с помощью ВЭЖХ

Каротиноиды экстрагировали 96% этанолом и количественно определяли согласно Król et al. (1995). Пигменты определяли путем измерения оптической плотности при 440 нм. Время удерживания и факторы ответа для хлорофилла a , хлорофилла b , лютеина, β -каротина, неоксантина, виолаксантина, антераксантина и зеаксантина были определены ранее (Król et al., 1995). Анализ проводился с использованием программного обеспечения хроматографа (System Gold; Beckham Instruments).Чтобы свести к минимуму инструментальную погрешность, выборки были запущены в случайном порядке. Состояние эпоксидирования пигментов ксантофиллового цикла рассчитывали по формуле (V + 1 / 2A) / (V + A + Z).

Несколько неидентифицированных пиков были обнаружены на хроматограммах экстрактов с более поздних стадий старения. Мы предположили, что некоторые из этих пигментов могли быть эфирами каротиноидов, поэтому мы омыли экстракты из поздней фазы 3 (3 октября), добавив к экстрактам 25 мкл л 20% КОН, затем инкубируя смеси в темноте на льду в течение 18 часОмыленные экстракты снова фильтровали перед анализом ВЭЖХ. Концентрации неоксантина, виолаксантина и антераксантина увеличились примерно на 50% в омыленных экстрактах, что указывает на то, что эти каротиноиды высвобождались из сложных эфиров при омылении. Количество зеаксантина, лютеина, β -каротина, хлорофилла a и хлорофилла b изменилось незначительно. Таким образом, результаты показывают, что в осенних листьях присутствовали сложные эфиры неоксантина, виолаксантина и антераксантина.

Два пигмента (со временем удерживания 6,2 и 6,5 мин соответственно) не подверглись омылению; первый пигмент лишь незначительно накапливается во время старения и иногда присутствует в листьях других растений (данные не показаны), тогда как второй не обнаруживался до 19 сентября и накапливался после этого. Первый пигмент имел спектр поглощения, подобный виолаксантину (пики при 443 и 472 нм в нашей системе), а второй пигмент имел пики при 448 и 473 нм.Они обозначаются каротиноидами X и Y (CX и CY). Два пигмента (время удерживания 8,2 и 8,3 мин соответственно) имели пики поглощения при 438 и 467 нм (аналогично неоксантину) и исчезали при омылении. Эти пигменты были предварительно идентифицированы как сложные эфиры неоксантина (NE1 и NE2). Другой пигмент со временем удерживания 8,5 мин также исчез после омыления, но имел спектр поглощения, напоминающий спектр поглощения виолаксантина, с пиками при 443 и 471 нм, поэтому этот пигмент мог представлять собой сложный эфир виолаксантина (VE1).Пик со временем удерживания 8,9 мин представлял собой неразрешенный дублет, который исчезал в омыленном экстракте. Спектр поглощения этого пика больше всего напоминал неоксантин, поэтому мы обозначили его NE3, несмотря на то, что он, скорее всего, соответствует двум различным эфирам каротиноидов. Дублет появлялся при временах удерживания 9,4 и 9,6. Эти пигменты исчезли при омылении. Спектры поглощения переднего и заднего пиков в дублете напоминали спектры неоксантина и виолаксантина соответственно.Эти пики были обозначены NE4 и VE2 соответственно. Наконец, пик с наибольшей площадью (время удерживания 10 мин) имел спектр, напоминающий спектр виолаксантина, но этот пигмент был стабильным во время омыления. Мы условно обозначили этот пигмент VX.

Эти пигменты не были строго идентифицированы, поэтому их назначение было сделано исключительно из практических соображений и носит предварительный характер. Например, увеличение количества антераксантина после омыления указывает на присутствие сложных эфиров антераксантина, но ни один из пиков не был отнесен к сложным эфирам антераксантина.В дополнение к пигментам, обсуждаемым здесь, на хроматограммах также появилось несколько незначительных неназначенных пиков (с типичными спектрами поглощения каротиноидов).

Измерения АТФ и сахара

Около 20 мг материала измельченных листьев (смесь пяти листьев для каждого финика) экстрагировали в 3% TCA. АТФ определяли методом люциферазы светлячков (Gardeström and Wigge, 1988). АДФ измеряли после катализируемого пируваткиназой превращения в АТФ (Roche Diagnostics).

Растворимые сахара (Suc, Glc и Fru) и крахмал измеряли в растворимой и остаточной фракциях водно-этанольных экстрактов согласно Stitt et al.(1989).

TEM

Десять кусочков, каждая с площадью поверхности около 1,5 мм 2 , вырезали из каждого листа и инфильтровали в мягком вакууме в течение 15 минут в 3% (мас. / Об.) Глутаровом альдегиде / 0,1 м фосфатном буфере ( pH 7,2), затем инкубировали в течение 4 ч при комнатной температуре (первичная фиксация), промывали фосфатным буфером и меняли на 2% (вес / объем) тетроксид осмия в течение 2 ч (вторичная фиксация). После промывки в дистиллированной воде образцы дегидратировали в серии градуированных этанолов, переносили в пропиленоксид на 3 × 10 мин, а затем добавляли по каплям эпоксирезин (TAAB 812; TAAB Laboratories) каждые 10 мин до тех пор, пока концентрация смолы не достигала приблизительно 10% ( в / в).Затем образцы оставляли на ротаторе на ночь. На следующий день смолу последовательно меняли каждые 4 часа на 25%, 50% и, наконец, 75%, затем инкубировали при 75% в течение ночи, после чего их выдерживали в 100% смоле в течение половины дня и затем заливали на кремний. рамки и инкубировали при 60 ° C в течение 1 дня. После заливки образцы вырезали алмазным ножом и переносили на медные сетки 200 меш с покрытием Formvar. Сетки окрашивали 3% водным раствором уранилацетата в течение 30 минут и цитратом свинца в течение 10 минут перед исследованием под просвечивающим электронным микроскопом JEOL JEM 1230, работающим при 80 кВ.

Элементный анализ

N%, C%, δ 13 C и δ 15 Значения N объединенных образцов листьев были измерены в соответствии с Ohlsson и Wallmark (1999) с использованием изотопа в непрерывном потоке. масс-спектрометр соотношения (анализатор стабильных изотопов 20–20; Europa Scientific), сопряженный с блоком элементного анализатора (система ANCA-NT, модуль подготовки твердой / жидкой фазы; Europa Scientific).

Концентрации железа, серы, фосфора и калия в объединенных образцах листьев были измерены согласно Emteryd (2003) с использованием масс-спектрометра с индуктивно связанной плазмой (Elan 6100; Perkin-Elmer).

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *